摘 要: | 从豆瓣酱中筛选出一株能高效降解亚硝酸盐的菌株 LJ01,经鉴定为蜡样芽孢杆菌. 通过测定 LJ01 细胞中不同组分的酶活,研究了亚硝酸盐还原酶的初步定位.LJ01 经100mg/L 的 NaNO2 诱导后,用溶菌酶破壁,粗酶液先经阴离子 DEAE Sepharose Fast Flow层析柱分离,测定不同蛋白组分 a、b、c 降解亚硝酸盐的活力,利用 0.1 mol/L 无机电子供体丁二酸和亚硫酸钠等鉴定出组分 c 为亚硝酸盐还原酶,再经葡聚糖凝胶 G-150 层析柱分离,获得较纯的亚硝酸盐还原酶,每升发酵液可得到 0.54 mg 活性酶蛋白,酶蛋白活力达到 4004. 89 U/mg,得率为 2.37%,纯化后其 NiR 的比活力提高了 17. 57 倍. 经 SDS-PAGE 电泳后确定 LJ01 中亚硝酸盐还原酶的单体分子质量约为 30ku.
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