| 限制性内切酶MluⅠ基因的合成、克隆和初步表达 |
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| 引用本文： | 覃鸿妮, 钱莉春, 沈晓燕, 梅啸,.限制性内切酶MluⅠ基因的合成、克隆和初步表达[J].西南师范大学学报(自然科学版),2016,41(10):46-53. |
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| 作者姓名： | 覃鸿妮 钱莉春 沈晓燕 梅啸 |
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| 作者单位： | 苏州工业园区服务外包职业学院；
苏州金唯智生物科技有限公司； |
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| 摘 要： | 在已知基因序列但缺乏DNA模版的情况下,人工设计合成多条引物,采用重叠PCR技术体外人工合成899bp的MluⅠ基因和1 312bp的M.MluⅠ基因.并将合成的MluⅠ基因连接到表达载体pet30a上,重组表达载体构成pet30a-MluⅠ,将M.MluⅠ基因连接到表达载体PUC19上,重组表达载体构成PUC19-M.MluⅠ.测序结果显示,载体构建成功后利用体外重组转化技术,将pet30a-MluⅠ和PUC19-M.MluⅠ转入T7expression E.coli表达菌株中.重组工程菌经IPTG诱导,用SDS-PAGE鉴定,发现限制性内切酶MluⅠ成功表达.该酶的成功表达不仅为后续研究提供了材料,而且为实验室制备限制性内切酶在方法上开辟了新的途径,为更多新发现的内切酶基因的成功克隆提供了参考.
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| 关 键 词： | 限制性内切酶 MluⅠ基因的合成 基因克隆 基因表达 |
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