| 山药基因组DNA的提取和RAPD反应条件的优化 |
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| 引用本文： | 李明军,徐鑫,张晓丽,刘永康.山药基因组DNA的提取和RAPD反应条件的优化[J].河南师范大学学报(自然科学版),2007,35(1):140-143. |
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| 作者姓名： | 李明军 徐鑫 张晓丽 刘永康 |
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| 作者单位： | 河南师范大学,生命科学学院,河南,新乡,453007 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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河南省科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 研究了山药基因组DNA的提取方法;对Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶用量进行了优化,建立了最佳的RAPD反应体系:在25μL反应体系中Mg2+浓度为2.0 mmol.L-1,dNTPs浓度为0.25 mmol.L-1,引物浓度为20 pmol.L-1,Taq酶1.5 U,模板DNA为200 ng.扩增程序为:95℃预变性7 min;94℃变性30 s,36℃退火45 s,72℃延伸2 min,共35个循环;72℃终延伸10 min.
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| 关 键 词： | 山药 DNA RAPD 优化 |
| 文章编号： | 1000-2367(2007)01-0140-04 |
| 修稿时间： | 2006年7月8日 |
Isolation of Genomic DNA and Optimization of RAPD Conditions of Dioscorea opposita Thunb |
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| LI Ming-jun,XU Xin,ZHANG Xiao-li,LIU Yong-kang.Isolation of Genomic DNA and Optimization of RAPD Conditions of Dioscorea opposita Thunb[J].Journal of Henan Normal University(Natural Science),2007,35(1):140-143. |
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| Authors: | LI Ming-jun XU Xin ZHANG Xiao-li LIU Yong-kang |
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| Abstract: | This article studied the method of genomic DNA isolation of Dioscorea opposita Thunb.and the optimization of Mg2+,dNTPs,primer and Taq DNA polymerase concentration.An optimal PCR system for RAPD analysis was selected as follows: 2.0 mM Mg2+,0.25 mM dNTPs,0.2 μM primer,1.5 U Taq DNA polymerase and 200 ng template DNA in 25 μl reaction volume.The PCR program for RAPD analysis was determined: preheat denatured at 95 ℃ for 7 min;denatured at 94 ℃ for 30 s,primer annealing at 36 ℃ for 45 s,extension at 72 ℃ for 2 min,35 cycles in total;at last extension 72 ℃for 10 min. |
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| Keywords: | Dioscorea opposita Thunb DNA RAPD Optimization |
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