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基于CRISPR/Cpf1系统下的诱导型多基因激活体系的建立
引用本文:黄秋月,李中瀚,殷旖珂.基于CRISPR/Cpf1系统下的诱导型多基因激活体系的建立[J].四川大学学报(自然科学版),2021,58(1):016003.
作者姓名:黄秋月  李中瀚  殷旖珂
作者单位:四川大学生命科学学院,四川大学生命科学学院,四川大学生命科学学院
基金项目:四川大学专职博士后项目(2018SCU12053)
摘    要:为开发高效率的内源多基因激活工具,利用CRISPR/Cpf1系统能够促使pre-crRNA中多个crRNA自我剪切和释放的特性,将As/Fn/LbCpf1的核酸酶区域定点突变形成dCpf1,并在C端和N端分别引入了VPR三元转录激活域和不稳定结构域(DD-domain)、四环素控制的操纵子,构建了TRE3G-DD-dCpf1-VPR激活系统。结果显示,Oct4基因的转录水平提升高达10~4倍,且Myod1、Oct4基因的转录水平分别在Dox和TMP单药的控制下,能够实现不同程度的转录水平的提升,在加双药的条件下Myod1、Oct4基因可分别提高80、120多倍。证明该系统能够通过靶向DNA快捷、高效的进行诱导内源性多基因激活。

关 键 词:CRISPR/Cpf1系统  诱导性  多基因激活
收稿时间:2020/6/21 0:00:00
修稿时间:2020/6/29 0:00:00

An inducible CRISPR/Cpf1 system for multiplex gene activation
HUANG Qiu-Yue,LI Zhong-Han and YIN Yi-Ke.An inducible CRISPR/Cpf1 system for multiplex gene activation[J].Journal of Sichuan University (Natural Science Edition),2021,58(1):016003.
Authors:HUANG Qiu-Yue  LI Zhong-Han and YIN Yi-Ke
Institution:College of Life Sciences, Sichuan University,College of Life Sciences, Sichuan University,College of Life Sciences, Sichuan University
Abstract:
Keywords:CRISPR/Cpf1 system  Inducible  Multi-activation
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