| 麻疯树小热激蛋白JcHSP-17.5的纯化与活性鉴定 |
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| 引用本文： | 徐漪沙,樊佳,晏华立,徐莺,陈放.麻疯树小热激蛋白JcHSP-17.5的纯化与活性鉴定[J].四川大学学报(自然科学版),2013,50(5):1119-1123. |
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| 作者姓名： | 徐漪沙 樊佳 晏华立 徐莺 陈放 |
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| 作者单位： | 四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院;四川大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(31070301) |
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| 摘 要： | 将实验室已有的pET32a-JcHSP17.5重组载体,经测序验证后,转入大肠杆菌BL21(DE3)plysS中,不同温度条件下,用不同浓度异丙基硫代-D-半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白表达,优化表达条件;选择镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化JcHSP-17.5蛋白,SDS-PAGE电泳检测蛋白纯度;通过热激聚合反应来鉴定蛋白的分子伴侣活性.结果表明,17℃,200r/min,0.5mM IPTG诱导13h为JcHSP-17.5蛋白的最佳诱导表达条件,使用200mmol/L咪唑缓冲液纯化蛋白后,每500mL菌液可得到1.345mg的电泳纯蛋白,该蛋白在高温(45℃)条件下能够阻止苹果酸脱氢酶(MDH)发生聚合反应,表现出较强的分子伴侣活性.
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| 关 键 词： | 麻疯树 小热激蛋白 异源表达 亲和纯化 热激聚合反应 |
| 收稿时间： | 2012/5/17 0:00:00 |
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