| 靶向survivin基因的shRNA慢病毒载体的构建及其对膀胱癌EJ细胞凋亡的影响 |
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| 引用本文： | 陶燕,付生军,洪梅,王志平,马宝良,卢建中.靶向survivin基因的shRNA慢病毒载体的构建及其对膀胱癌EJ细胞凋亡的影响[J].暨南大学学报,2015(3). |
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| 作者姓名： | 陶燕 付生军 洪梅 王志平 马宝良 卢建中 |
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| 作者单位： | 兰州大学第二医院 泌尿外科研究所，甘肃省泌尿系统疾病研究重点实验室，甘肃省泌尿系临床医学中心，甘肃 兰州 730030 |
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| 基金项目： | 甘肃省科技计划项目(1308RJYA056)；甘肃省泌尿系疾病临床医学中心开放课题基金项目(mnlczxkf -28)；兰州大学中央高校基本科研业务费项目 |
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| 摘 要： | 目的:构建survivin基因特异性shRNA慢病毒干扰载体,转染膀胱癌EJ细胞,研究survivin基因在膀胱癌细胞株中的表达抑制情况,观察survivin shRNA慢病毒载体对EJ细胞凋亡的影响.方法:以survivin基因为靶标设计shRNA干扰序列,克隆至p SIH1-H1-cop GFP慢病毒载体.干扰载体鉴定正确后转染膀胱癌细胞株EJ细胞,荧光显微镜下观察GFP表达情况,实时荧光定量PCR检测survivin基因mRNA含量变化,Western blotting法检测survivin蛋白表达,Annexin V-FITC/PI双染法检测EJ细胞凋亡情况.结果:PCR扩增鉴定、DNA测序证实survivin慢病毒干扰载体构建成功;EJ细胞经干扰载体处理后,EJ细胞survivin基因mRNA水平下调了73.33%,蛋白表达受到显著抑制,EJ细胞凋亡率达到24.39%.结论:成功构建了靶向survivin基因的shRNA重组慢病毒干扰载体,可以显著降低转染细胞survivin基因的表达水平,并有效提高膀胱癌细胞凋亡率.
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| 关 键 词： | 载体构建 survivin 短发卡状 RNA(shRNA) 膀胱癌 细胞凋亡 |
Construction and identification of survivin shRNA lentivirus vector and its effects on apoptosis of bladder cancer EJ cells |
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| TAO Yan,FU Shengjun,HONG Mei,WANG Zhiping,MA Baoliang,LU Jianzhong.Construction and identification of survivin shRNA lentivirus vector and its effects on apoptosis of bladder cancer EJ cells[J].Journal of Jinan University(Natural Science & Medicine Edition),2015(3). |
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| Authors: | TAO Yan FU Shengjun HONG Mei WANG Zhiping MA Baoliang LU Jianzhong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | vector construction survivin short hairpin RNA(shRNA) bladder cancer cell apoptosis |
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