| 大肠杆菌caiE基因的克隆与高效表达 |
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| 引用本文： | 范立强,袁勤生,吴祥甫.大肠杆菌caiE基因的克隆与高效表达[J].华东理工大学学报(自然科学版),2002,28(2):149-152. |
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| 作者姓名： | 范立强 袁勤生 吴祥甫 |
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| 作者单位： | 1. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室
2. 中国科学院上海生物化学研究所,上海,200031 |
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| 摘 要： | 用聚合酶链反应（PCR）从大肠杆菌K12s中扩增大肠杆菌肉碱代谢相关酶基因cai E,将其克隆到克隆载体pBluescripy SK中，测序表明：该基因有612bp，与文献报道相比，有10个核苷酸不同，相应的翻译氨基酸有6个相异，将该基因重组到ColE1为复制子，T7为启动子控制下的分泌型表达载体pET-22b( )中，构建表达质粒pETCaiE，重组到载体pACYC184中构建以p15A为复制子，Lac为启动子的表达质粒pACYC-CaiE；重组到载体pWSK129中，构建以pSC101为复制子，T7为启动子的表达质粒pSC-CaiE。上述表达质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），经1mmol/L异丙基硫代－β－D－半乳糖苷（IPTG）诱导后，均可表达，SDS－PAGE分析表明表达蛋白分子质量约26ku，表达量占菌体总蛋白质的比例分别为pETCaiE30%,pACYC-CaiE8%,pSC-CaiE5%。
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| 关 键 词： | 肉碱 表达载体 基因克隆 基因表达 大肠杆菌 |
| 文章编号： | 1006-3080(2002)02-0149-04 |
| 修稿时间： | 2001年4月12日 |
Cloning and Expression of Escherichia coli caiE Gene |
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| FAN Li qing ,YUAN Qin sheng ,WU Xiang fu.Cloning and Expression of Escherichia coli caiE Gene[J].Journal of East China University of Science and Technology,2002,28(2):149-152. |
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| Authors: | FAN Li qing YUAN Qin sheng WU Xiang fu |
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| Institution: | FAN Li qing 1,YUAN Qin sheng 1*,WU Xiang fu 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | carnitine expression vector gene cloning gene expression E coli |
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