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菊粉内切酶在毕赤酵母中的表达及酶学性质测定
引用本文:王淮,罗文浩,普元倩,徐春萍,杨健康.菊粉内切酶在毕赤酵母中的表达及酶学性质测定[J].井冈山大学学报(自然科学版),2020,41(3):34-38.
作者姓名:王淮  罗文浩  普元倩  徐春萍  杨健康
作者单位:大理大学基础医学院,云南,大理 671000;中山大学光华口腔医学院,广东,广州 510080
基金项目:大理大学博士科研启动基金项目(KYBS201603)
摘    要:为了实现菊粉内切酶在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的高活性表达并对表达的菊粉内切酶酶学性质、水解菊粉的产物进行分析。通过下载无花果曲霉菊粉内切酶基因的编码序列,做了密码子优化后进行全基因合成,然后在毕赤酵母GS115中表达。对表达的菊粉内切酶的酶活、最适反应温度、最适pH值、热稳定性进行了分析,最后对酶水解菊粉的产物进行了高效液相色谱(HPLC)分析。摇瓶表达的酶活力为420 U/mL,酶的最适反应温度为55℃,最适反应pH为6.0。HPLC分析表明:表达的菊粉内切酶酶解底物菊粉的主要产物为低聚果糖,聚合度为3~5之间。构建的工程酵母可以高效表达菊粉内切酶,可以用于生产低聚果糖。

关 键 词:毕赤酵母  菊粉内切酶  表达  酶学性质  水解产物
收稿时间:2020/1/9 0:00:00
修稿时间:2020/3/12 0:00:00

EXPRESSION OF ENDOINULINASE IN PICHIA PASTORIS AND DETERMINATION OF ITS ENZYMATIC PROPERTIES
WANG Huai,LUO Wen-hao,PU Yuan-qian,XU Chun-ping and YANG Jian-kang.EXPRESSION OF ENDOINULINASE IN PICHIA PASTORIS AND DETERMINATION OF ITS ENZYMATIC PROPERTIES[J].Journal of Jinggangshan University(Natural Sciences Edition),2020,41(3):34-38.
Authors:WANG Huai  LUO Wen-hao  PU Yuan-qian  XU Chun-ping and YANG Jian-kang
Institution:School of Basic Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China,Guanghua School of Stomatology, Sun Yat-sen University, Guangzhou, Guangdong 510080, China,School of Basic Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China,School of Basic Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China and School of Basic Medical Sciences, Dali University, Dali, Yunnan 671000, China
Abstract:
Keywords:Pichia pastoris  endoinulinase  expression  enzymatic properties  hydrolysate
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