杂交瘤细胞株功能性与非功能性V_k基因结构分析 |
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引用本文: | 王硕,沈关心,蒋琳,王晓林,熊伟,卢昌秀.杂交瘤细胞株功能性与非功能性V_k基因结构分析[J].江汉大学学报(自然科学版),1997(2). |
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作者姓名: | 王硕 沈关心 蒋琳 王晓林 熊伟 卢昌秀 |
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作者单位: | 武汉职工医学院基础部
(王硕,蒋琳),同济医科大学
(沈关心,王晓林,熊伟),同济医科大学(卢昌秀) |
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摘 要: | 本研究利用逆转录PCR技术和家族特异性引物,先后从9株分泌不同特异性单抗杂交瘤细胞株中扩增出了轻、重链可变区基因,并经克隆和序列测定。其中利用轻链引物(VL5.1和VL3.1)从分泌抗转铁蛋白受体(anti-transferrlin receptor)单抗的杂交瘤细胞株(7579)中扩增出了无功能的V_k序列。经分析和与GenBank数据库比较,该序列虽与BALB/cV_k21-E细胞株分泌的抗体轻链有98%同源性,但是在其V/J连接区内有4个碱基对缺失,导致后续阅读框架移位,因而出现终止密码子而致翻译停止。当改变引物(VL5.2和VL3(JK1/2))之后,又分别从该种杂交瘤细胞株中扩增出有功能的V_k基因序列。说明同种杂交瘤细胞中,部分细胞出现基因异常性重排(aberrant rearrangement),而这种重排的V-J基因片段来源于原融合细胞MOPC-21骨髓瘤细胞系。
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关 键 词: | V_k基因 序列分析 抗体 单克隆 |
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