DNA紫外吸收定量法中干扰校正用沉淀剂存在的问题及改进方法 |
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引用本文: | 熊燕飞,班宜辉,张建坤,刘东,徐鹏,陈燕.DNA紫外吸收定量法中干扰校正用沉淀剂存在的问题及改进方法[J].江汉大学学报(自然科学版),2019,47(1):29-35. |
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作者姓名: | 熊燕飞 班宜辉 张建坤 刘东 徐鹏 陈燕 |
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作者单位: | 武汉理工大学 化学化工与生命科学学院,湖北 武汉,430070;武汉理工大学 化学化工与生命科学学院,湖北 武汉,430070;武汉理工大学 化学化工与生命科学学院,湖北 武汉,430070;武汉理工大学 化学化工与生命科学学院,湖北 武汉,430070;武汉理工大学 化学化工与生命科学学院,湖北 武汉,430070;武汉理工大学 化学化工与生命科学学院,湖北 武汉,430070 |
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摘 要: | 核酸定量分析的紫外吸收法中,采用钼酸铵-过氯酸沉淀大分子核酸,以校正酸溶性小分子物质的干扰。对钼酸铵-过氯酸沉淀剂存在的问题进行了分析探讨,并研究了以乙醇作为沉淀剂的改进方法,对乙醇的pH值、用量、沉淀时间、离心速度和离心时间等因素进行了考察,确定了乙醇作为沉淀剂的检测方法和条件。试验结果显示,钼酸铵-过氯酸沉淀剂在260 nm处有较强的光吸收,严重干扰测定结果,同时,结果重现性差。采用pH 3. 0的95%乙醇作为沉淀剂,校正小分子物质的紫外吸收干扰,测定结果相对误差可控制在5%以下,样品回收率达(97. 7±2. 1)%,方法稳定可靠,所用试剂简单、安全、操作简便,可用于DNA样品的常规定量检测及教学实验。
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关 键 词: | DNA定量 紫外吸收法 干扰校正 改进方法 乙醇沉淀 |
Problem Analysis and Improvement Method of Precipitant of DNA Quantification with UV Absorption on Error Compensation Issue |
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Abstract: | |
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