| 人细胞周期蛋白cyclin E基因的克隆与真核表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 熊伟,陈贵元,何敏,左绍远.人细胞周期蛋白cyclin E基因的克隆与真核表达载体的构建[J].大理学院学报,2011,10(6):21-24. |
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| 作者姓名： | 熊伟 陈贵元 何敏 左绍远 |
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| 作者单位： | 1. 云南大学生命科学学院,昆明,650031
2. 大理学院基础医学院,云南大理,671000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的:为研究细胞周期蛋白在肿瘤形成过程的分子机制,构建带FLAG标签的细胞周期蛋白E的真核表达载体,并检测其在瞬时转染HeLa细胞株中的蛋白表达。方法:通过RT-PCR扩增cyclinE基因编码cDNA,并将扩增的cDNA片段插入p3XFLAG-CMVTM-14真核表达载体,重组子经酶切分析和测序鉴定后,用脂质体介导的基因瞬时转染法,将重组正确的表达载体转染HeLa细胞,用Western-blot技术检测其在HeLa细胞中融合蛋白的表达。结果:经酶切鉴定和测序分析证实人cyclin E的真核表达载体构建成功,并能在瞬时转染的HeLa细胞中表达。结论:成功构建了人cyclin E的真核表达载体,为进一步研究细胞周期蛋白的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 细胞周期蛋白 载体构建 真核表达 |
Human Cyclin E Cloning and Eukaryotic Expression Vector Construction |
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| XIONG Wei,CHEN Guiyuan,HE Min,ZUO Shaoyuan.Human Cyclin E Cloning and Eukaryotic Expression Vector Construction[J].Journal of Dali University,2011,10(6):21-24. |
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| Authors: | XIONG Wei CHEN Guiyuan HE Min ZUO Shaoyuan |
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| Institution: | 1.College of Life Science,Yunnun University,Kunming 650031,China; 2.Pre-clinical College,Dali University,Dali,Yunnan 671000,China) |
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| Abstract: | Objective： To construct eukalyotic expression vector with FLAG epitope highly expressing human cyclin E gene. Methods： Amplify the eDNA of eye/in E gene from total RNA isolated from HeLa ceils using RT-PCR. After sequenced, the open reading frame （ORF） of |
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| Keywords: | cyclins plasmid vector construction eukaryotie expression |
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