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LITAF基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定
引用本文:姜勋亮,张贺龙,张峰,康艳霞,附舰,庞海林,闵婕.LITAF基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定[J].科学技术与工程,2016,16(2).
作者姓名:姜勋亮  张贺龙  张峰  康艳霞  附舰  庞海林  闵婕
作者单位:第四军医大学唐都医院肿瘤科,第四军医大学唐都医院肿瘤科,第四军医大学唐都医院肿瘤科,第四军医大学唐都医院肿瘤科,第四军医大学唐都医院肿瘤科,第四军医大学唐都医院肿瘤科,第四军医大学唐都医院肿瘤科
基金项目:]国家自然科学基金资助项目(项目编号:81101819)#$NL[作者单位]第四军医大学唐都医院肿瘤科, 陕西 西安 710038
摘    要:目的:探讨构建人脂多糖诱导肿瘤坏死因子释放因子(LITAF)基因的过表达慢病毒载体的技术方法并检测其体外表达目的基因的水平。方法:设计LITAF基因引物,应用聚合酶链反应(PCR)的方法扩增LITAF基因片段,应用EcoRI、BamHI酶切LV8载体,通过连接酶将LITAF基因片段连接至线性化的LV8载体上,应用酶切及测序方法鉴定LITAF-LV8重组质粒。将其包装慢病毒后感染293T细胞(人胚肾细胞),观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,验证后感染肝癌细胞株HepG2。RT-PCR和Western-blot鉴定感染后HepG2中LITAF的表达。结果:LITAF基因在慢病毒感染的HepG2细胞中的表达显著高于对照组细胞。结论:成功构建了过表达LITAF的HepG2细胞株,为后期研究提供了实验基础。

关 键 词:LITAF  慢病毒  载体构建  过表达  肝细胞肝癌
收稿时间:8/3/2015 12:00:00 AM
修稿时间:1/6/2016 12:00:00 AM

Construction and Identificationof Lentiviral Vector Over-expressing LITAF
Jiang Xun Liang,Zhang He Long,Zhang Feng,Kang Yan Xi,Fu Jian,Pang Hai Lin and.Construction and Identificationof Lentiviral Vector Over-expressing LITAF[J].Science Technology and Engineering,2016,16(2).
Authors:Jiang Xun Liang  Zhang He Long  Zhang Feng  Kang Yan Xi  Fu Jian  Pang Hai Lin and
Abstract:
Keywords:LITAF  lentivirus  vector construction  over-expression  hepatocellular carcinoma
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