| 抗癌胚抗原纳米抗体展示文库的构建与筛选 |
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| 引用本文： | 刘亚文,宋海鹏.抗癌胚抗原纳米抗体展示文库的构建与筛选[J].科学技术与工程,2018,18(28). |
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| 作者姓名： | 刘亚文 宋海鹏 |
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| 作者单位： | 长春理工大学生命科学技术学院;吉林亚泰生物药业股份有限公司;长春力太生物技术有限公司 |
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| 摘 要： | 利用噬菌体展示技术进行纳米抗体库的构建和筛选,获得抗癌胚抗原(CEACAM5)的高亲和力、强特异性纳米抗体,为相关癌症诊断及靶向治疗的应用奠定基础。使用重组CEACAM5抗原免疫羊驼,分离免疫后羊驼的外周血淋巴细胞,提取总RNA后通过RT-PCR技术扩增羊驼重链抗体可变区(VHH)片段,构建纳米抗体文库。采用噬菌体展示技术和固相淘选方法,筛选得到强阳性克隆,经大肠杆菌表达和镍离子亲和层析获得纳米抗体,最终利用Biacore分析其亲和力和特异性。通过3轮的淘选,获得一株纳米抗体亲和力达到2.6×10-10mol·L-1,对同源性蛋白CEACAM-1、-3、-6、-8及肿瘤蛋白AFP均无交叉反应性。利用噬菌体展示技术成功获得了抗癌胚抗原(CEACAM5)的高亲和力、强特异性纳米抗体,可用于后续相关癌症诊断和靶向治疗。
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| 关 键 词： | 癌胚抗原 纳米抗体 噬菌体展示 亲和力 特异性 |
| 收稿时间： | 2018/5/8 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/7/9 0:00:00 |
Construction and Identification of Nanobody Display Libraries Recognizing CEACAM5 |
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| liuyawen and.Construction and Identification of Nanobody Display Libraries Recognizing CEACAM5[J].Science Technology and Engineering,2018,18(28). |
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| Authors: | liuyawen and |
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| Institution: | School of life science and technology, changchun university of science and technology, |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Carcinoembryonic antigen Nanobody Phage display Affinity Specificity |
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