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CD226分子siRNA慢病毒载体的构建和鉴定
引用本文:张圆.CD226分子siRNA慢病毒载体的构建和鉴定[J].科学技术与工程,2010,10(13).
作者姓名:张圆
作者单位:第四军医大学免疫学教研室,西安,710032
基金项目:国家自然科学基金课题(30801003)资助
摘    要:为设计筛选针对人CD226分子的siRNA序列,构建相应的siRNA慢病毒载体,检测其对Jurkat/E6细胞膜表面天然CD226分子表达水平的影响,首先设计并合成4对siRNA双链寡聚核苷酸,与CD226分子真核表达载体共同转染293T细胞,挑选出最有效抑制CD226表达的序列。应用基因工程技术,将该序列连接于慢病毒载体pLKO.1中,构建携带针对目的基因CD226的siRNA慢病毒载体。使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒载体共转染293T细胞,收集上清,感染Jurkat/E6细胞系,对病毒感染效果进行检测。结果在4条针对CD226分子设计的siRNA序列中,siRNA—513最为有效的抑制了外源性CD226分子的表达,带有该序列的慢病毒载体pLKO—CD226可以完全抑制Jurkat/E6细胞上天然分子的表达。说明应用基因工程技术成功构建了针对CD226分子的RNA干扰慢病毒载体,为深入研究人类黏附分子CD226在机体免疫功能方面提供了技术支持。

关 键 词:CD226  siRNA  慢病毒载体  
收稿时间:2/25/2010 3:33:49 PM
修稿时间:2/25/2010 3:33:49 PM

The Construction and Identification of CD226 molecule siRNA Lentiviral Vector
zhang yuan.The Construction and Identification of CD226 molecule siRNA Lentiviral Vector[J].Science Technology and Engineering,2010,10(13).
Authors:zhang yuan
Abstract:
Keywords:CD226 siRNA Lentiviral vector  
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