趋化素样因子1对肾癌细胞ACHN生物活性的影响及其相关机制

通过质粒转染实现趋化素样因子1(Chemokine-like Factor 1,CKLF1)在肾癌细胞ACHN中过表达, 探究CKLF1对肾癌细胞ACHN细胞增殖和凋亡的影响及机制研究。方法：将实验组pEGFP-N1-CKLF1和对照组pEGFP-N1真核细胞表达质粒分别转染肾癌ACHN细胞，实现趋化素样因子1在ACHN细胞中的过表达。利用荧光显微镜，镜下观察质粒转染效率。利用CCK8实验观察肾癌细胞ACHN转染24、48、72小时后增殖情况；利用流式细胞术检测ACHN细胞转染24、48、72小时后细胞周期的变化情况；利用Hoechst33258染色法观察转染48小时后， ACHN细胞形态变化，利用流式细胞术检测各组细胞凋亡率。采用Western blot法检测CKLF1过表达后，蛋白Cyclin D1、、Bcl-xL、STAT3、P-STAT3表达情况。结果: 1、荧光显微镜下90%以上的细胞有绿色荧光蛋白表达，证明转染效率良好。2、CCK8检测结果显示：转染48、72小时后，实验组肾癌细胞ACHN的增殖情况均明显高于对照组,差异有显著性意义48小时(P ＜0.05)，72小时（P ＜0.05）；3、流式细胞术检测结果显示：实验组增值指数PI明显高于对照组, 差异有显著性意义24h(P ＜0.01),48h(P ＜0.01),72h (P ＜0.01) 。4、 荧光显微镜下Hoechst 染色结果显示：与对照组相比较，实验组凋亡小体数量较少。流式细胞术检测结果显示，与对照组相比较，转染后48小时后实验组细胞凋亡率明显降低（P ＜0.05）。5、Western blot结果: 与对照组相比较，周期相关蛋白Cyclin D1表达明显高于对照组，差异有显著性意义（P＜0.05）；实验组凋亡相关蛋白Bcl-xL表达量明显高于对照组（P ＜0.05）;实验组JAK-STAT信号通路蛋白P-STAT3明显高于对照组（P＜0.05）。 结论：趋化素样因子1过表达可促进肾癌细胞ACHN的增殖、抑制其凋亡，其发生机制可能与JAK-STAT信号通路有关。CKLF1可能是肾透明细胞癌的新的治疗靶点。

Effect of of chemokine-like factor 1 on on the biological activity of renal cancer cells ACHN and its mechanism