| 人胰岛素原DNA疫苗的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 蒋铁建,周智广,等.人胰岛素原DNA疫苗的构建与鉴定[J].科学技术与工程,2003,3(2):139-142. |
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| 作者姓名： | 蒋铁建 周智广 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所,长沙,410011 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30170440) |
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| 摘 要： | 构建1型糖尿病关键自身抗原胰岛素原（Proinsulin）的DNA疫苗，并在体外对其表达产物进行鉴定。从人胰腺cDNA库用半巢式PCR扩增出编码Proinsulin的cDNA，克隆入载体PGEM－T中，再将其亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1（＋）中，构建重组载体pcDNA3.1( )／Proinsulin，测序后在真核细胞COS－7中进行体外短暂表达，Western印迹法对其表达产物进行鉴定。结果克隆的人Proinsulin基因，测序表明其cDNA序列与Genbank公布的序列基本相同，仅在第63位氨基酸（C肽区）有一CAG（Glu)→CGG（Arg）的突变，Western免疫印迹法证实DNA疫苗在COS－7细胞中有效地获得了表达。结果说明运用基因克隆方法构建的Proinsulin DNA疫苗，在真核细胞内能有效地表达Proinsulin重组抗原。该疫苗的构建成功，为1型糖尿病的免疫干预提供了实验基础。
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| 关 键 词： | DNA疫苗 分子克隆 胰岛素原 1型糖尿病 |
| 文章编号： | 1671-1815(2003)02-0139-04 |
| 修稿时间： | 2002年11月19 |
Construction and Identification of Human Proinsulin DNA Vaccine |
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| JIANG Tiejian,ZHOU Zhiguang,SU Heng,LUO Jianhua Institute of Metabolism and Endocrinology,Second Xiangya Hospital,Central South University,Changsha.Construction and Identification of Human Proinsulin DNA Vaccine[J].Science Technology and Engineering,2003,3(2):139-142. |
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| Authors: | JIANG Tiejian ZHOU Zhiguang SU Heng LUO Jianhua Institute of Metabolism and Endocrinology Second Xiangya Hospital Central South University Changsha |
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| Institution: | JIANG Tiejian,ZHOU Zhiguang,SU Heng,LUO Jianhua Institute of Metabolism and Endocrinology,Second Xiangya Hospital,Central South University,Changsha 410011 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | DNA vaccine cloning molecular Proinsulin type 1 diabetes |
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