翘嘴红鲌热休克蛋白60的基因克隆及其表达特征分析（英文）

利用同源克隆和RACE技术克隆了翘嘴红鲌热休克蛋白HSP60 cDNA全长序列,并对HSP60基因的序列特征进行了分析。EiHSP60 cDNA序列长2 323 bp,开放阅读框为1 728 bp,编码575个氨基酸,其编码蛋白相对分子量为61.26 k D,等电点为5.27。BLAST分析结果表明EiHSP60与哺乳动物、鸟和鱼类等物种的CCT具有较高的同源性。生物信息学分析结果显示,EiHSP60蛋白序列中包含1个典型的分子伴侣蛋白60信号基序。实时荧光定量PCR检测结果显示,EiHSP60在翘嘴红鲌各个组织中均有表达,但在肝脏中的表达量为最高。使用脂多糖对翘嘴红鲌进行攻毒后,在不同时间段取其肝脏总RNA,利用实时荧光定量PCR技术进行EiHSP60 m RNA的表达水平分析。分析结果显示,经过脂多糖攻毒后翘嘴红鲌HSP60呈现时间依赖型的表达模式,且在肝脏中的表达水平呈现上调趋势。上述结果表明,EiHSP60为一种涉及免疫反应的诱导型蛋白,而高表达量的EiHSP60可能在提高翘嘴红鲌免疫反应过程中发挥重要作用。