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核桃V-ATPase c亚基基因(JrVHAc4)的克隆和抗旱功能分析
引用本文:李大培,王艺,张尚昆,赵翔,赵焕元,刘玉梅,杨桂燕.核桃V-ATPase c亚基基因(JrVHAc4)的克隆和抗旱功能分析[J].南京林业大学学报(自然科学版),2019,62(2):79-85.
作者姓名:李大培  王艺  张尚昆  赵翔  赵焕元  刘玉梅  杨桂燕
作者单位:(1.西北农林科技大学林学院,山阳核桃板栗试验示范站,陕西 杨凌 712100; 2.西北农林科技大学林学院,陕西省经济植物资源开发利用重点实验室,陕西 杨凌 712100)
基金项目:国家自然科学基金项目(31800510);陕西省自然科学基础研究计划项目(2018JQ3066);大学生创新创业训练计划项目(201803072)
摘    要:【目的】V-ATPase是植物逆境响应的重要酶,有必要了解V-ATPase相关亚基参与核桃响应逆境胁迫的功能机制。【方法】从‘香玲’核桃转录组中克隆获得1条V-ATPase c 亚基基因(命名为JrVHAc4),通过分析启动子预测其逆境响应功能。对JrVHAc4基因进行干旱胁迫下的表达分析,同时构建JrVHAc4酵母表达载体转入酵母表达系统研究其抗旱功能。【结果】JrVHAc4基因开放读码框(ORF)全长495 bp,拟推导的蛋白分子量为16 527.61 u,包含164个氨基酸,理论等电点为8.62; 其上游1 047 bp启动子包含MYC、DOF、MYB等与干旱响应相关的顺式作用元件。干旱胁迫下,JrVHAc4基因在核桃叶和根中均被显著诱导,并存在差异。对JrVHAc4转基因酵母进行不同浓度甘露醇胁迫,与对照酵母相比,发现JrVHAc4基因的表达能显著提高转基因酵母的生长活性。【结论】JrVHAc4基因能响应干旱胁迫,并能提高酵母的抗旱能力,JrVHAc4可作为核桃抗逆重要候选基因。

关 键 词:核桃  干旱胁迫  V-ATPASE  表达分析  酵母表达系统

Drought resistance analysis of a V-ATPase c subunit (JrVHAc4)gene from Juglans regia
LI Dapei,WANG Yi,ZHANG Shangkun,ZHAO Xiang,ZHAO Huaiiyuan,LIU Yumei,YANG Guiyan.Drought resistance analysis of a V-ATPase c subunit (JrVHAc4)gene from Juglans regia[J].Journal of Nanjing Forestry University(Natural Sciences ),2019,62(2):79-85.
Authors:LI Dapei  WANG Yi  ZHANG Shangkun  ZHAO Xiang  ZHAO Huaiiyuan  LIU Yumei  YANG Guiyan
Institution:(Walnut and Chestnut Experiment Station of Shanyang,College of Forestry,Northwest A & V University,Yangling 712100,China;Key Laboratory of Economic Plant Resources Development and Ltilizationin Shaanxi Province,College of Forestry,Northwest A & F University,Yangling 712100,China)
Abstract:LI Dapei;WANG Yi;ZHANG Shangkun;ZHAO Xiang;ZHAO Huaiiyuan;LIU Yumei;YANG Guiyan(Walnut and Chestnut Experiment Station of Shanyang,College of Forestry,Northwest A & V University,Yangling 712100,China;Key Laboratory of Economic Plant Resources Development and Ltilizationin Shaanxi Province,College of Forestry,Northwest A & F University,Yangling 712100,China)
Keywords:Juglans regia  drought stress  V-ATPase  expression analysis  yeast expression system
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