| 猪呼吸道冠状病毒核衣壳蛋白基因的克隆及原核表达 |
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| 引用本文： | 曹敏杰,郭川,吴国平,翁凌,苏文金.猪呼吸道冠状病毒核衣壳蛋白基因的克隆及原核表达[J].集美大学学报(自然科学版),2005,10(1):29-32. |
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| 作者姓名： | 曹敏杰 郭川 吴国平 翁凌 苏文金 |
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| 作者单位： | 集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021;集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021;集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021;集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021;集美大学生物工程学院,福建,厦门,361021 |
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| 基金项目： | 福建省科技攻关计划重点项目 (2003N083)，厦门市科技攻关计划重点项目 (3502Z20031054)，集美大学科研启动基金项目 |
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| 摘 要： | 以RT—PCR法从猪呼吸道冠状病毒(PRCV)感染的ST细胞中得到核衣壳蛋白(N蛋白)cDNA，并以此为模板利用PCR技术完成了N蛋白的基因扩增．通过双酶切、连接、转化等过程构建了猪PRCVN蛋白基因的重组原核表达质粒，表达产物经SDS—PAGE、Western blot检测被确认为GST融合的N蛋白．表达蛋白与PRCV阳性血清间有良好的免疫结合性．
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| 关 键 词： | 猪呼吸道冠状病毒 N蛋白 克隆 表达 |
| 文章编号： | 1007-7405(2005)01-0029-04 |
| 修稿时间： | 2004年5月24日 |
Cloning and Expression of Porcine Respiratory Coronavirus (PRCV) Nucleocapsid Protein |
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| CAO Min-jie,GUO Chuan,WU Guo-ping,WENG Ling,SU Wen-jin.Cloning and Expression of Porcine Respiratory Coronavirus (PRCV) Nucleocapsid Protein[J].the Editorial Board of Jimei University(Natural Science),2005,10(1):29-32. |
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| Authors: | CAO Min-jie GUO Chuan WU Guo-ping WENG Ling SU Wen-jin |
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| Abstract: | Porcine respiratory coronavirus (PRCV) nucleocapsid protein (N protein) cDNA was (prepared) by RT-PCR using ST cells infected by PRCV.Using this cDNA as template,N protein full-length sequence DNA was amplified by PCR. Followed by restriction enzyme digestion,ligation and transformation,a recombinant pGEX 4T N protein plasmid was constructed.Expressed PRCV N protein occupied approximately 20 % of total bacteria protein and was mainly in soluble form as checked by SDS-PAGE. The protein was regarded as GST fused PRCV N protein after Western blot detection both using anti-GST monoclonal antibody and PRCV positive swine sera. |
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| Keywords: | porcine respiratory coronavirus N protein cloning expression |
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