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获得四环素抗性的温敏同源重组载体质粒pRNT15的构建
引用本文:贾艳华,孙钒,庞义.获得四环素抗性的温敏同源重组载体质粒pRNT15的构建[J].中山大学学报(自然科学版),2008,47(5).
作者姓名:贾艳华  孙钒  庞义
作者单位:(中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室, 广东 广州510275)
摘    要: 苏云金芽孢杆菌工程菌株TnX对蚊幼虫具有高毒力,但红霉素抗性基因的存在限制了其商品化。根据转座子Tn917载体的基因序列,利用重叠延伸PCR法克隆同源重组序列到pRN5101上得到pRN15,根据pBU4载体上的四环素抗性基因序列,对pRN15进行改造,使其失去红霉素抗性,获得四环素抗性,载体命名为pRNT15。重组载体四环素抗性的获得,使之扩大了使用范围,也为工程菌株染色体中红霉素抗性基因的敲除奠定了基础。

关 键 词:苏云金芽孢杆菌  重叠延伸PCR  抗性基因  基因敲除
收稿时间:2008-04-15;
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