NS特异性干扰载体pGenesil-1-NS的构建及鉴定 |
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引用本文: | 高鸿霞,王国庆,刘燕,霍中华,李钰.NS特异性干扰载体pGenesil-1-NS的构建及鉴定[J].北华大学学报(自然科学版),2015(6):729-732. |
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作者姓名: | 高鸿霞 王国庆 刘燕 霍中华 李钰 |
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作者单位: | 北华大学医学检验学院,吉林 吉林,132013;北华大学附属医院,吉林 吉林,132011 |
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基金项目: | 吉林省卫生厅基金,吉林市科技创新服务平台项目 |
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摘 要: | 目的核干细胞因子(nucleostemin,NS)是维持干细胞和癌细胞增殖所必需的蛋白质,可能成为肿瘤基因治疗的潜在靶点.本文旨在构建靶向NS干扰载体p Genesil-1-NS,为后续实验奠定基础.方法基于已发布的NS mRNA序列(NM_206825),选取5'-AAGCCTA GGAAAGACCCAGG-3'(397-416)作为候选靶序列,按shRNA载体设计原则,设计合成两条互补DNA链,退火后插入载体,并以酶切和测序鉴定重组转化子.结果经酶切及测序鉴定证实合成序列正确插入载体.结论成功构建NS特异性干扰载体p Genesil-1-NS,可用于NS在肿瘤中的功能研究.
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关 键 词: | 核干细胞因子基因 pGenesil-1载体 发夹状RNA RNA干扰 |
Construction and Identification of pGenesil-1-NS Interference Vector |
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Abstract: | |
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Keywords: | nucleostemin gene pGenesil-1 vector shRNA RNAi |
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