人IGFBP-1基因真核表达载体的构建及其对胃癌细胞BGC-823增殖的影响 |
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引用本文: | 陈璐,袁睿韬,曹鹏,梁怀盼.人IGFBP-1基因真核表达载体的构建及其对胃癌细胞BGC-823增殖的影响[J].北华大学学报(自然科学版),2019,20(2). |
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作者姓名: | 陈璐 袁睿韬 曹鹏 梁怀盼 |
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作者单位: | 南京市浦口区中心医院,江苏 南京,211800;江苏大学医学院,江苏 镇江,212013;南京金域医学检验所,江苏 南京,210044 |
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基金项目: | 南京市医学科技发展项目 |
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摘 要: | 目的构建IGFBP-1真核表达载体,观察IGFBP-1基因真核表达载体转染胃癌细胞株BGC-823后基因的表达及其对BGC-823细胞增殖的影响.方法以GES-1细胞基因组为模板,PCR技术扩增人IGFBP-1的基因片段,克隆人pc DNA3-His-Flag真核表达载体,重组载体pc DNA3-IGFBP-1-His-Flag,并通过PCR、双酶切和测序鉴定.重组质粒经阳离子脂质体法转染BGC-823细胞,RT-PCR和Western blot检测细胞IGFBP-1的表达情况,并通过CCK8法观察IGFBP-1过表达对BGC-823细胞增殖的影响.结果经PCR、双酶切和测序鉴定证明IGFBP-1真核表达载体构建成功,并在胃癌细胞株BGC-823高效表达.CCK8实验显示:IGFBP-1过表达对BGC-823细胞增殖无影响.结论成功构建IGFBP-1真核表达载体,IGFBP-1过表达对BGC-823细胞的增殖无影响,可为进一步研究IGFBP-1生物学功能奠定基础.
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关 键 词: | IGFBP-1 真核表达 BGC-823细胞 细胞增殖 |
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