| GI和GII诺如病毒ERA的可视化快速检测 |
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| 引用本文： | 杨艳歌,吴占文,李涛,王帅,李红娜,孙冬梅,袁飞.GI和GII诺如病毒ERA的可视化快速检测[J].华南理工大学学报(自然科学版),2023(12):140-151. |
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| 作者姓名： | 杨艳歌 吴占文 李涛 王帅 李红娜 孙冬梅 袁飞 |
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| 作者单位： | 1. 中国检验检疫科学研究院国家市场监管重点实验室(食品质量与安全);2. 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目（2022YFF0607900,2018YFC1603606）~~； |
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| 摘 要： | 诺如病毒（NoV）是常见的食源性病毒之一，只要极少数量的NoV就可以导致机体感染发病，但目前还没有特效的治疗药物和疫苗，因此建立快速检测方法对食品中的NoV进行早期筛查至关重要。本研究首先通过装甲RNA技术将GB 4789.42规定的GI和GII NoV的靶标基因包裹到MS2噬菌体的衣壳蛋白中，制成内含GI和GII NoV两联检测靶标的重组质粒参考样品，其次基于酶促等温扩增（ERA）技术，分别设计了GI和GII NoV基础型ERA和荧光型ERA检测的引物和探针，并通过试验筛选确定了最佳的引物探针组合。从而建立了GI和GII NoV检测ERA显色法和荧光法两种可视化方法，通过肉眼可直接观测结果。进一步对反应程序进行了优化，将ERA显色法和荧光法的扩增时间分别缩短至5 min和8 min。并通过对反应体系的优化，将体系减半，从而降低了检测成本。在此情况下，对核酸参考样品检测的最低灵敏度分别可达10-2、10-3 ng/μL。最后将本研究建立的可视化快速检测方法应用于真实的GI和GII NoV粪便样本检测，并对方法的性能参数进行分析，结果显示：建立的GI和GII NoV ERA可视化快速检测...
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| 关 键 词： | 诺如病毒 重组质粒 酶促重组等温扩增 可视化 快速检测 |
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