| 棉花脱氢抗坏血酸还原酶基因的克隆、原核表达与纯化 |
| |
| 引用本文： | 李学宁,杜军伟,李鸿彬.棉花脱氢抗坏血酸还原酶基因的克隆、原核表达与纯化[J].石河子大学学报,2010,28(5). |
| |
| 作者姓名： | 李学宁 杜军伟 李鸿彬 |
| |
| 作者单位： | 李学宁,李鸿彬,LI Xuening,LI Hongbin(石河子大学生命科学学院/石河子大学农业生物技术重点实验室,石河子,832003);杜军伟,DU Junwei(石河子大学动物科技学院,石河子,832003) |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 |
| |
| 摘 要： | 为进一步探讨脱氢抗坏血酸还原酶的生物学功能,克隆棉花的脱氢抗坏血酸还原酶基因,对该基因进行了原核表达,并对重组蛋白进行纯化和分析。通过RT-PCR方法扩增脱氢抗坏血酸还原酶基因全长,利用BamH I和Xhol I酶切位点将其克隆至组氨酸(histidine,His)融合蛋白表达载体pET28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,经异丙基硫代--βD-半乳糖苷(isopropy--βD-5-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,用SDS-PAGE鉴定表达产物,并用亲和层析柱纯化重组表达的pET28a-DHAR蛋白。结果表明:重组体PET28a-DHAR经测序和酶切鉴定证实构建成功。导入大肠杆菌BL21进行表达,SDS-PAGE分析目的蛋白高效表达,相对分子量为26 kD左右,并获得了纯化的His-DHAR融合蛋白。
|
| 关 键 词： | 棉花 脱氢抗坏血酸还原酶基因 克隆 原核表达 |
Cloning,Prokaryotic Expression and Purification of a Cotton Dehydroascorbate Reductase Gene |
| |
| LI Xuening,DU Junwei,LI Hongbin.Cloning,Prokaryotic Expression and Purification of a Cotton Dehydroascorbate Reductase Gene[J].Journal of Shihezi University(Natural Science),2010,28(5). |
| |
| Authors: | LI Xuening DU Junwei LI Hongbin |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
