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Klenow大片段聚合酶及T4DNA聚合酶在构建重组质粒中的应用
引用本文:董玲,陈创夫,韩亚杰,张金波,祝建波.Klenow大片段聚合酶及T4DNA聚合酶在构建重组质粒中的应用[J].石河子大学学报,2006,24(2):170-172.
作者姓名:董玲  陈创夫  韩亚杰  张金波  祝建波
作者单位:[1]新疆地方与民族高发病实验室,新疆石河子832003 [2]石河子大学生命科学学院,新疆石河子832003
摘    要:利用大肠杆菌Klenow大片段聚合酶5'→3'聚合酶活性和T4DNA聚合酶3'→5'外切酶特性构建植物高效表达载体pBLT35Svp4-ST.用pUC18-435S中的T35S启动子取代植物表达载体pBLG-VP4-ST中的双35S启动子,通过Klenow大片段的聚合酶活性对植物表达载体pBLG-VP4-ST中的HindⅢ3'凹端补平,再利用T4DNA聚合酶外切酶活性将质粒pUC18-435S的四倍35S启动子即T35S中的SacⅠ3'凸端削平.在T4DNA连接酶作用下将一端为平端,另一端为BamHⅠ的粘性末端的四倍35S启动子定向连接到植物表达载体PBLG-VP4-ST中取代原有的双35S启动子,转化并筛选阳性克隆.结果经PCR和酶切鉴定证实,四倍35S启动子成功连接到植物表达载体PBLG-VP4-ST中.

关 键 词:Klenow大片段聚合酶  T4DNA聚合酶  构建
文章编号:1007-7383(2006)02-0170-03
收稿时间:2005-11-03
修稿时间:2005年11月3日

Application of Klenow Polymerase and T4 DNA Polymerase in Construction Recombinant Plasmid
DONG Ling,CHEN Chuang-fu,HAN Ya-jie,ZHANG Jin-bo,ZHU Jian-bo.Application of Klenow Polymerase and T4 DNA Polymerase in Construction Recombinant Plasmid[J].Journal of Shihezi University(Natural Science),2006,24(2):170-172.
Authors:DONG Ling  CHEN Chuang-fu  HAN Ya-jie  ZHANG Jin-bo  ZHU Jian-bo
Abstract:
Keywords:PBLG-VP4-ST
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