| NT3的酵母双杂交诱饵载体的构建和初步鉴定 |
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| 引用本文： | 罗星,孔雪,徐坚,于娜,张峪涵,仙玲玲,杨磊,黄瑾.NT3的酵母双杂交诱饵载体的构建和初步鉴定[J].石河子大学学报,2005,23(2):166-169. |
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| 作者姓名： | 罗星 孔雪 徐坚 于娜 张峪涵 仙玲玲 杨磊 黄瑾 |
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| 作者单位： | 新疆地方与民族高发病实验室，新疆地方与民族高发病实验室，复旦大学生命科学院遗传工程国家重点实验室，新疆地方与民族高发病实验室，新疆地方与民族高发病实验室，新疆地方与民族高发病实验室，新疆地方与民族高发病实验室，新疆地方与民族高发病实验室 新疆石河子832002复旦大学生命科学院遗传工程国家重点实验室，上海200433，新疆石河子832002，上海200433，新疆石河子832002，新疆石河子832002，新疆石河子832002，新疆石河子832002，新疆石河子832002 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30260029)，新疆生产建设兵团专向基金(NKBOISDXN29YX) |
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| 摘 要： | 构建和转化神经营养素3(neurotrophin 3,NT3)的酵母诱饵重组质粒,为通过酵母双杂交研究NT3的功能及作用机制奠定基础。用PCR扩增NT3基因cDNA中编码完整开放读框的基因片段;将该基因片段与pLexA载体定向重组;用酶切和测序鉴定重组质粒;将核苷酸序列正确的重组质粒转化入EGY48p8op LacZ]酵母菌株。结果成功构建pLexA NT3重组质粒。转化有重组质粒和pLexA空载体的二种EGY48p8op LacZ]酵母都能在SD Gal Raf His Ura培养基中长成白色菌落(同时,转化pLexA pos阳性对照质粒的酵母菌在相同条件下长成蓝色菌落),但都不能在SD His Leu Ura培养基中生长,在SD His Ura液中培养16h后,OD600均值均为0.8±0.1。这表明,重组质粒表达的融合蛋白没有激活LEU2和lacZ酵母报告基因表达的活性,也没有酵母毒性作用。因此,构建的诱饵重组质粒可以用于下一阶段的人胎脑cDNA文库筛选。
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| 关 键 词： | NT3 酵母双杂交 诱饵质粒 |
| 文章编号： | 1007-7383(2005)02-0166-04 |
| 修稿时间： | 2005年3月25日 |
Construction and Identification of Yeast Bait Plasmids Carrying NT3 cDNA Fragment |
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| LUO Xing.Construction and Identification of Yeast Bait Plasmids Carrying NT3 cDNA Fragment[J].Journal of Shihezi University(Natural Science),2005,23(2):166-169. |
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| Authors: | LUO Xing |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NT3 Yeast two-hybrid bait plasmids |
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