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绵羊ISG15基因的克隆表达与纯化
引用本文:崔茹鹏,沈文,鲁海富,孙延鸣.绵羊ISG15基因的克隆表达与纯化[J].石河子大学学报,2013(1):39-42.
作者姓名:崔茹鹏  沈文  鲁海富  孙延鸣
作者单位:石河子大学动物科技学院
基金项目:石河子大学自然科学与技术团队创新项目(2011ZRKXTD0105);国家自然科学基金项目(31060351)
摘    要:为了克隆并表达绵羊ISG15,且对其表达产物进行纯化,首先从绵羊外周血单核细胞(PBMC)中提取总RNA,通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR),扩增出ISG15的基因;再通过基因克隆技术,构建ISG15在pET28a中的重组表达质粒pET28a-ISG15,在大肠杆菌BL21(DE3)用IPTG进行诱导表达,得到ISG15的原核表达蛋白;最后采用Ni 2+-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白。结果显示:克隆的绵羊ISG15基因序列长度为541bp,编码157个氨基酸。重组表达产物通过SDS-PAGE可检测到相对分子质量为25ku的重组蛋白,且表达的目的蛋白能被Ni 2+-NTA亲和层析方法所纯化。该研究为后续深入研究绵羊ISG15奠定基础。

关 键 词:绵羊  ISG15基因  克隆  表达

The Cloning,Expression and Purification of Sheep ISG15 Gene
CUI Rupeng,SHEN Wen,LU Haifu,SUN Yanming.The Cloning,Expression and Purification of Sheep ISG15 Gene[J].Journal of Shihezi University(Natural Science),2013(1):39-42.
Authors:CUI Rupeng  SHEN Wen  LU Haifu  SUN Yanming
Institution:(College of Animal Science &Technology,Shihezi University,Shihezi 832003,China)
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 等数据库收录!
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