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基于氧化石墨烯的磺胺嘧啶核酸适配体的筛选与鉴定
引用本文:吴娟,吴平,寇启明,孙琦,王亚荣,严雪凌,施海星,乐涛.基于氧化石墨烯的磺胺嘧啶核酸适配体的筛选与鉴定[J].重庆师范大学学报(自然科学版),2021,38(2):112-120.
作者姓名:吴娟  吴平  寇启明  孙琦  王亚荣  严雪凌  施海星  乐涛
作者单位:重庆师范大学生命科学学院,重庆401331
摘    要:目的]利用GO-SELEX方法对磺胺嘧啶(Sulfadiazine)核酸适配体进行筛选与鉴定.方法]基于氧化石墨烯(Graphene oxide)与ssDNA的π-π堆积作用,将氧化石墨烯作为结合ssDNA与分离的介质,以磺胺嘧啶为靶标分子,利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)和磁分离技术建立了基于氧化石墨烯的核酸适配体筛选方法GO-SELEX,对筛选产物测序所得的核酸序列进行了同源性分析和二级结构预测,亲和力和特异性分析以及方法学考察.结果]经过9轮筛选,获得了对磺胺嘧啶具有较高亲和力(Kd = 411 nmol·L-1)的核酸适配体Ap-41,且Ap-41对磺胺嘧啶的特异性良好;磺胺嘧啶质量浓度在1.0~40μg·mL-1范围内与荧光强度的线性关系良好,检出限为0.029 μg·mL-1,水样中加标回收率范围为95.0%~104.0%,相对标准偏差不超过6.1%.结论]基于核酸适配体Ap-41的检测方法灵敏度较高,可用于后续传感器的构建及实际样品中磺胺嘧啶的检测.

关 键 词:氧化石墨烯  磺胺嘧啶  核酸适配体  指数富集的配体系统进化技术(SELEX)  筛选  鉴定

Screening and Identification of Sulfadiazine Aptamer Based on Graphene Oxide
WU Juan;,WU Ping;,KOU Qiming;,SUN Qi;,WANG Yarong;,YAN Xueling;,SHI Haixing;,LE Tao.Screening and Identification of Sulfadiazine Aptamer Based on Graphene Oxide[J].Journal of Chongqing Normal University:Natural Science Edition,2021,38(2):112-120.
Authors:WU Juan;  WU Ping;  KOU Qiming;  SUN Qi;  WANG Yarong;  YAN Xueling;  SHI Haixing;  LE Tao
Abstract:
Keywords:
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