| 本生烟组织培养及遗传转化体系的建立 |
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| 引用本文： | 崔海涛,李春霞,王红艳,陈红运,竺晓平,时呈奎,李向东.本生烟组织培养及遗传转化体系的建立[J].山东科学,2006,19(1):23-27. |
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| 作者姓名： | 崔海涛 李春霞 王红艳 陈红运 竺晓平 时呈奎 李向东 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学植物保护学院,山东,泰安,271018
2. 国家质检总局动植物检疫实验所,北京,100029 |
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| 基金项目： | 中国科学院资助项目;山东省优秀中青年科学家科研奖励基金 |
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| 摘 要： | 本文研究了通过农杆菌侵染获得本生烟(Nicotiana benthamiana)转基因植株的方法。将本生烟中上部叶片消毒后切成5mm×5mm左右的小块作为外植体,在含有6-BA(3mg/L)和NAA(0.2mg/L)的MS培养基中培养2~3d,用含有表达载体的农杆菌侵染后共培养3~4d,转入含有6-BA(3mg/L)、NAA(0.2mg/L)和卡那霉素(100mg/L)的MS培养基中培养2~3周。将外植体边缘产生的愈伤组织和芽点转移到只含有卡那霉素(100mg/L)的MS培养基中继续培养,2周后分化出大量不定芽。继续培养2周,当芽长1~3cm时,将芽转移到含IBA(0.1mg/L)的MS培养基中分化生根,得到再生植株。当再生植株高8~10cm、根长4~5cm以上时,移栽到经过灭菌的营养土中。通过实时荧光PCR扩增,从获得的植株中检测35S启动子和NOS终止子外源基因片段,判定所得的植株的确为转基因植株。最后对本生烟组织培养中应该注意的问题进行了讨论。
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| 关 键 词： | 本生烟 组织培养 MS培养基 实时荧光PCR |
| 文章编号： | 1002-4026（2006）01-0023-05 |
| 收稿时间： | 2005-06-26 |
| 修稿时间： | 2005年6月26日 |
Construction of tissue culture and genetic transformation systems of Nicotiana benthamiana |
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| CUI Hai-tao,LI Chun-xia,WANG Hong-yan,CHEN Hong-yun,ZHU Xiao-ping,SHI Cheng-kui,LI Xiang-dong.Construction of tissue culture and genetic transformation systems of Nicotiana benthamiana[J].Shandong Science,2006,19(1):23-27. |
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| Authors: | CUI Hai-tao LI Chun-xia WANG Hong-yan CHEN Hong-yun ZHU Xiao-ping SHI Cheng-kui LI Xiang-dong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nicotiana benthamiana tissue culture MS media real-time fluorescent PCR |
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