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脑心肌炎病毒pCMV-HA-VP2表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达
引用本文:李倩,李向茸,王兴陇,马瑞仙,李生军,冯若飞.脑心肌炎病毒pCMV-HA-VP2表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达[J].西北民族学院学报,2018(3):46-51.
作者姓名:李倩  李向茸  王兴陇  马瑞仙  李生军  冯若飞
作者单位:西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室;西北民族大学生命科学与工程学院;甘肃省动物细胞工程技术研究中心
摘    要:目的:构建脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2,并在HEK293细胞中表达.方法:提取EMCV的总RNA,RT-PCR扩增VP2基因,酶切后构建带HA标签的真核表达质粒pCMV-HA-VP2,运用脂质体介导法将其转染至HEK293细胞中,分别进行过表达检测、Westernblotting分析及IFA检测来验证VP2基因的转录及表达情况.结果:重组表达载体pCMV-HA-VP2构建成功,转染至HEK293细胞中,VP2蛋白和HA标签融合表达成功.结论:EMCV衣壳蛋白VP2基因的真核表达载体pCMV-HA-VP2在HEK293细胞中的成功表达,为EMCV衣壳蛋白的功能研究提供理想的实验材料,同时也为EMCV感染机制及其受体研究奠定基础.

关 键 词:脑心肌炎病毒  VP2基因  真核表达载体  HEK293细胞

Construction of pCMV-HA-VP2 Expression Vector for Encephalomyocarditis Virus and Expression in HEK293 Cells
Abstract:
Keywords:
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