| Sry基因的克隆及其在HeLa细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 张衍泉,余秀琴,王丽莉,廖尚英,朱宝长.Sry基因的克隆及其在HeLa细胞中的表达[J].首都师范大学学报(自然科学版),2008,29(4). |
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| 作者姓名： | 张衍泉 余秀琴 王丽莉 廖尚英 朱宝长 |
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| 作者单位： | 1. 首都师范大学生命科学院,北京,100037
2. 中国科学院动物研究所,北京,100101 |
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| 基金项目： | 本研由国家自然科学基金资助
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教育部留学回国人员研究基金(2002)资助完成 |
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| 摘 要： | 目的:构建真核表达重组质粒pCR3.1-Sry.并检验其在真核细胞内的表达.方法:用PCR法从小鼠基因组中扩增出Sty全长基因,重组入pMD18-T载体,酶切鉴定重组质粒,对酶切正确的重组质粒测序.双酶切测序验证的重组质粒.将切下的片段与真核表达质粒pCR3.1相连构建pCR3.1-Sty重组质粒.将其转染HeLa细胞后,RT-PCR法检测重组质粒在细胞中mRNA的转录;免疫荧光法检测重组质粒在细胞中蛋白质的表达.结果:PCR法扩增得到了1.2 kb的特异性Sry基因片段;成功地构建了真核表达重组质粒pCR3.1-Sry;重组质粒pCR3.1-Sry在HeLa细胞中mRNA及蛋白水平均可检测到表达.结论:重组质粒构建成功并可以在体外真核细胞中表达,为进一步研究其作为核酸疫茁的免疫作用提供了可控的实验材料.
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| 关 键 词： | Sry基因 质粒构建 真核表达 |
68903623.Construction of Recombinant Vector pCR 3.1-Sry and its Expression in HeLa Cells |
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