| 大肠杆菌 aroL 基因敲除及其对莽草酸合成的影响 |
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| 引用本文： | 付小花,高益范,郝思捷,张伯生,任大明.大肠杆菌 aroL 基因敲除及其对莽草酸合成的影响[J].复旦学报(自然科学版),2007,46(3):366-370. |
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| 作者姓名： | 付小花 高益范 郝思捷 张伯生 任大明 |
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| 作者单位： | 复旦大学,生命科学学院,遗传学研究所,遗传工程国家重点实验室,上海,200433 |
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| 摘 要： | 以E.coli DH5α基因组为模板克隆莽草酸激酶Ⅱ基因(aroL),构建质粒pMD-aroL,经HpaⅠ、BsaBⅠ酶切后插入卡那霉素抗性基因(kan)得pMD-aroL::kan,利用pKD46的λ重组系统,用该质粒上的kan及两端的aroL同源序列替换E.coli Top10F′基因组上的aroL基因,再运用质粒pCP20编码的FLP重组酶消除kan基因.Southern blot证实基因敲除是成功的,测序结果表明kan已经从基因组上消除,摇瓶发酵显示构建的基因工程菌的莽草酸产量是原始菌株的1.57倍.
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| 关 键 词： | aroL 基因敲除 Red重组系统 |
| 文章编号： | 0427-7104（2007）03-0366-05 |
| 修稿时间： | 2006-08-30 |
Knockout of aroL Gene in Escherichia coli Top10F′and Its Effects on the Shikimic Acid Biosynthesis |
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| FU Xiao-hua,GAO Yi-fan,HAO Si-jie,ZHANG Bo-sheng,REN Da-ming.Knockout of aroL Gene in Escherichia coli Top10F′and Its Effects on the Shikimic Acid Biosynthesis[J].Journal of Fudan University(Natural Science),2007,46(3):366-370. |
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| Authors: | FU Xiao-hua GAO Yi-fan HAO Si-jie ZHANG Bo-sheng REN Da-ming |
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| Institution: | State Key Laboratory of Genetic Engineering, Institute of Genetics, School of Life Sciences, Fudan Unizersity , Shanghai 200433, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | aroL gene knockout Red recombinant system |
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