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堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建及鉴定
引用本文:闫晓菲,韩红玉,岳城,黄兵,赵其平,姜连连,董辉,卞庆松,张建哲.堆形艾美耳球虫孢子化卵囊cDNA文库的构建及鉴定[J].复旦学报(自然科学版),2007,46(6):937-940,946.
作者姓名:闫晓菲  韩红玉  岳城  黄兵  赵其平  姜连连  董辉  卞庆松  张建哲
作者单位:1. 新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052;中国农业科学院,上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232
2. 中国农业科学院,上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海,200232
3. 新疆农业大学,动物医学学院,乌鲁木齐,830052
基金项目:国家科技基础条件平台建设项目(2005DKA21205-4),国家高技术研究发展计划资助项目(2006AA10A207-1)
摘    要:构建堆形艾美耳球虫(Eimeria acervulina)孢子化卵囊cDNA表达文库,以筛选其功能性基因.用TRI-ZOL Reagent试剂提取堆形艾美耳球虫总RNA,再用Oligo(dT)12-纤维素柱从总RNA中分离mRNA,以mRNA为模板,RT-PCR法反转录合成cDNA第一链,用LD-PCR法扩增合成双链cDNA,经蛋白酶K消化、SfiⅠ酶切、CHROMA SPIN-400柱分离去除小于400 bp的片段后,将cDNA与已经SfiⅠ酶切的λTriplEx2载体按一定比例连接,经体外包装,建立堆形艾美耳球虫孢子化卵囊的噬菌体表达文库.随后测定文库容量为4.6×106pfu/mL,扩增文库的滴度为4.4×1010pfu/mL,重组率达到98%,插入片段大小为750~1 000 bp,并从扩增文库中扩增出了堆形艾美耳球虫巨噬细胞游走抑制因子基因片段.

关 键 词:  球虫  堆形艾美耳球虫  孢子化卵囊  cDNA文库
文章编号:0427-7104(2007)06-0937-04
收稿时间:2007-08-10
修稿时间:2007年8月10日

Construction and Identification of cDNA Library of Eimeria acervulina Sporulated Oocysts
YAN Xiao-fei,HAN Hong-yu,YUE Cheng,HUANG Bing,ZHAO Qi-pin,JIANG Lian-lian,DONG Hui,BIAN Qin-song,ZHANG Jian-zhe.Construction and Identification of cDNA Library of Eimeria acervulina Sporulated Oocysts[J].Journal of Fudan University(Natural Science),2007,46(6):937-940,946.
Authors:YAN Xiao-fei  HAN Hong-yu  YUE Cheng  HUANG Bing  ZHAO Qi-pin  JIANG Lian-lian  DONG Hui  BIAN Qin-song  ZHANG Jian-zhe
Abstract:
Keywords:chicken  coccidia  Eimeria acervulina  sporulated oocysts  cDNA library
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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