| 重组腺病毒介导RNA干扰人DLK1基因表达的研究 |
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| 引用本文： | 邢文明,徐晓,陈斐,张新,韩泽广.重组腺病毒介导RNA干扰人DLK1基因表达的研究[J].复旦学报(自然科学版),2009,48(3). |
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| 作者姓名： | 邢文明 徐晓 陈斐 张新 韩泽广 |
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| 作者单位： | 邢文明,张新,XING Wen-ming,ZHANG Xin(华东理工大学,生物工程学院,上海200237;上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家,重点实验室培育基地,国家人类基因组南方研究中心,上海市201203);徐晓,XU Xiao(上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家,重点实验室培育基地,国家人类基因组南方研究中心,上海市201203;上海交通大学,医学院附属瑞金医院,上海200025);陈斐,CHEN Fei(上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家,重点实验室培育基地,国家人类基因组南方研究中心,上海市201203);韩泽广,HAN Ze-guang(华东理工大学,生物工程学院,上海200237;上海市疾病与健康基因组学实验室-省部共建国家,重点实验室培育基地,国家人类基因组南方研究中心,上海市201203;上海交通大学,医学院附属瑞金医院,上海200025)
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)，国家杰出青年科学基金 |
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| 摘 要： | 构建抑制人DLK1基因表达的重组腺病毒载体,利用腺病毒载体介导的RNA干扰技术评价其在肝癌细胞株中的基因沉默效应.将针对人DLK1基因的RNAi寡核苷酸序列,连接到腺病毒穿梭质粒中,在含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183内进行同源重组.重组腺病毒载体在HEK-293细胞中包装扩增,得到高滴度的重组腺病毒.通过绿色荧光蛋白示踪腺病毒的感染效果,并通过荧光实时RT-PCR,western blot的方法证实重组腺病毒能够显著抑制DLK1基因在肝癌细胞株中的表达.
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| 关 键 词： | DLK1基因 RNA干扰 腺病毒 肝癌 |
RNA Interference with Human DLK1 Gene Mediated by Recombinant Adenovirus |
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| XING Wen-ming,XU Xiao,CHEN Fei,ZHANG Xin,HAN Ze-guang.RNA Interference with Human DLK1 Gene Mediated by Recombinant Adenovirus[J].Journal of Fudan University(Natural Science),2009,48(3). |
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| Authors: | XING Wen-ming XU Xiao CHEN Fei ZHANG Xin HAN Ze-guang |
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| Institution: | 1.School of Bioengineering;East China University of Science and Technology;Shanghai 200237;China;2.Shanghai-Ministry Key Laboratory of Disease and Health Genomics;Chinese National Human Genome Center at Shanghai;Shanghai 201203;3.Rui Jin Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine;Shanghai 200025;China |
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| Abstract: | High-effective vectors for knockdown of DLK1 gene were constructed by adenovirus-mediated RNAi technology and the RNA interference effect of DLK1 was evaluated in human hepatocellular carcinoma(HCC) cell lines.The oligonucleotide sequences encoding the DLK1-specific siRNA cassettes were cloned into the AdEasy shuttle vector pShuttle and homogonously recombined with an adenoviral backbone plasmid pAdEasy-1 in competent E.coli BJ5183 cells.The resultant adenoviral plasmids were packed in HEK293 cells,and viru... |
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| Keywords: | DLK1 gene RNA interference adenovirus hepatocellular carcinoma |
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