| 一种基于荧光检测的GST-pull down改进方法的建立及对Atsttrin-TNFR2相互作用的分析 |
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| 引用本文： | 王重喜,罗学刚,李朋彦,陈小颖,周浩,张同存.一种基于荧光检测的GST-pull down改进方法的建立及对Atsttrin-TNFR2相互作用的分析[J].天津科技大学学报,2015(1). |
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| 作者姓名： | 王重喜 罗学刚 李朋彦 陈小颖 周浩 张同存 |
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| 作者单位： | 1. 工业发酵微生物教育部重点实验室，天津市工业微生物重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津 300457
2. 工业发酵微生物教育部重点实验室，天津市工业微生物重点实验室，天津科技大学生物工程学院，天津 300457; 武汉科技大学生物医学研究院，武汉 430000 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)资助项目(2012AA021505)；教育部“长江学者和创新团队发展计划”资助项目 |
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| 摘 要： | 创建一种基于荧光检测的GST-pull down改进方法,用于蛋白质间相互作用分析.利用已确定具有相互作用的Atsttrin和TNFR2蛋白对作为实验对象,分别构建GST-Atsttrin和TNFR2-EYFP融合蛋白的原核和真核表达体系.将纯化的GST-Atsttrin与TNFR2-EYFP蛋白孵育后,经离心收集复合物,通过酶标仪检测其荧光值,从而分析Atsttrin和TNFR2间的相互作用.通过荧光值的检测成功分析了Atsttrin和TNFR2间的相互作用,荧光值的检测可代替传统方法中的Western blot分析,从而简化GST-pull down分析步骤、降低操作难度、并可对缺乏特异性抗体的靶蛋白进行有效地分析.
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| 关 键 词： | 蛋白质相互作用 荧光检测 GST-pull down |
An Improved Method of GST-pull Down Based on Fluorescence Detection and its Application to the Analysis of the Interaction between Atsttrin and TNFR2 |
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| WANG Chongxi,LUO Xuegang,LI Pengyan,CHEN Xiaoying,ZHOU Hao,ZHANG Tongcun.An Improved Method of GST-pull Down Based on Fluorescence Detection and its Application to the Analysis of the Interaction between Atsttrin and TNFR2[J].Journal of Tianjin University of Science & Technology,2015(1). |
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| Authors: | WANG Chongxi LUO Xuegang LI Pengyan CHEN Xiaoying ZHOU Hao ZHANG Tongcun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | protein interaction fluorescence detection GST-pull down |
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