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| 重组人肿瘤坏死因子蛋白TNF-α的纯化与功能鉴定 | |
| 引用本文： | 孔超,李丹,袁晓君,李斌.重组人肿瘤坏死因子蛋白TNF-α的纯化与功能鉴定[J].科技导报(北京),2017,35(8):70-74. |
| 作者姓名： | 孔超 李丹 袁晓君 李斌 |
| 作者单位： | 1. 上海大学生命科学学院, 上海市能源作物育种及应用重点实验室, 上海 200444; 2. 中国科学院上海巴斯德研究所分子病毒与免疫重点实验室, 上海 200031 |
| 基金项目： | 国家重点基础研究计划（973计划）项目（2014CB541803）；中国博士后科学基金项目（2012M520946）；国家自然科学基金重点项目（81330072） |
| 摘 要： | 串联亲和纯化系统（TAP）是近年来广泛使用的一种可在接近于生理条件下探究蛋白间相互作用的生化纯化方法。目前许多关于TAP 的研究报道均使用细胞内转录因子为目标蛋白，探索细胞内与其相互作用的蛋白分子。本文尝试建立一种细胞外配体-受体刺激介导的信号转导初始复合体的纯化体系，为此选择了一种多功能的免疫分子配体蛋白--肿瘤坏死因子蛋白超家族（TNFSF）中的核心成员TNF-α。TNF-α 是一个强效促炎因子，可介导炎症反应、细胞凋亡和激活等生理效应，是至今研究最多的TNFSF 成员。利用原核表达系统纯化出了一种带有多个标签的重组人源TNF-α 蛋白，通过检测其受体下游信号通路鉴定该蛋白与天然TNF-α 蛋白的生理活性相似，从而证明该蛋白可以用于胞外TAP 系统探究TNFR 下游信号通路，为配体-受体刺激介导的信号转导初始复合体的胞外串联亲和纯化系统的建立奠定了基础。 |
| 关 键 词： | 串联亲和纯化 肿瘤坏死因子 蛋白纯化 |
| 收稿时间： | 2016-04-22 |
Purification and functional analysis of human recombinant tumor necrosis factor-α |
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| KONG Chao,LI Dan,YUAN Xiaojun,LI Bin.Purification and functional analysis of human recombinant tumor necrosis factor-α[J].Science & Technology Review,2017,35(8):70-74. | |
| Authors: | KONG Chao LI Dan YUAN Xiaojun LI Bin |
| Institution: | 1. Shanghai Key Laboratory of Bio-energy Crops, College of Life Science, Shanghai University, Shanghai 200444, China; 2. Key Laboratory of Molecular Virology & Immunology, Institute Pasteur of Shanghai, Chinese Academy of Sciences, Shanghai 200031, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | tandem affinity purification protein purification TNF-α/TNFR |
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