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β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:李春华,廖贵芹,张桂敏,马立新.β-1,4-内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].湖北大学学报(自然科学版),2005,27(3):275-279.
作者姓名:李春华  廖贵芹  张桂敏  马立新
作者单位:湖北大学生命科学学院,湖北武汉430062
基金项目:农业微生物国家重点实验室开放课题(AML-0303)资助;武汉市科技攻关计划(20026002087)
摘    要:运用选择性培养基LBCMC从环境土样中分离得到一株能利用羧甲基纤维素的芽孢杆菌Bacillus sp.NW-2004a,并运用“鸟枪”克隆法构建了其基因组文库,且从此基因组文库中筛选得到两个阳性克隆.对其中一阳性克隆中插入的DNA片段(命名为GLUD)进行序列测定,发现了一长度为2502bp的开放阅读框(ORF),可编码834个氨基酸.BLAST分析结果表明,该基因与Bacillus sp.KSM-S237来源的纤维素酶基因AB018420具86%相似性,所编码的多肽与Bacillus sp.KSM-64来源的β—1,4-内切葡聚糖酶具89%的相似性,故该基因是一新发现的β—1,4-内切葡聚糖酶基因.该序列已收录于Genebank,登录号AY663839.另外,以cpoI and NotI限制性内切酶双酶切衍生于质粒pGEX的大肠杆菌表达载体pHBM625,然后将经T4 DNA polymerase处理后的β-1,4-内切葡聚糖酶基因克隆至载体pHBM625中得到重组质粒pHBM625Glu,最后通过平板检测及SDS—PAGE凝胶电泳,均检测到该基因在大肠杆菌XL10-Glod中的表达.

关 键 词:基因组文库  β-1  4-内切葡聚糖酶基因  大肠杆菌表达
文章编号:1000-2375(2005)03-0275-05
收稿时间:01 14 2005 12:00AM
修稿时间:2005年1月14日

Cloning of β-1,4-endo-glucanase gene and expression in Escherichia coli
Li ChunHua;Liao GuiQin;Zhang GuiMin;Ma LiXin.Cloning of β-1,4-endo-glucanase gene and expression in Escherichia coli[J].Journal of Hubei University(Natural Science Edition),2005,27(3):275-279.
Authors:Li ChunHua;Liao GuiQin;Zhang GuiMin;Ma LiXin
Abstract:
Keywords:
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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