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纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究
引用本文:闫达中,许芳,李洁,冯建成,杨艳燕.纳豆激酶基因克隆及其在大肠杆菌中活性表达研究[J].湖北大学学报(自然科学版),2003,25(1):69-72,92.
作者姓名:闫达中  许芳  李洁  冯建成  杨艳燕
作者单位:湖北大学生命科学学院,湖北武汉430062
基金项目:湖北省教育厅重点项目(2000A01018)
摘    要:以纳豆芽孢杆菌基因组DNA为模板,PCR扩增了纳豆激酶基因(natto kinase gene)中编码前肽、成熟肽的核苷酸序列(pro-NK),构建大肠杆菌表达质粒pTYB102,转化大肠杆菌ER2566。在IPTG诱导下,分别在15℃(14h)、30℃(3h)、37℃(2h)条件下培养,pTYB102均能表达出有活性的纳豆激酶。实验证实纳豆激酶基因得到活性表达需要Pro序列。SDS-PAGE表明,15℃和30℃和37℃培养表达的杂蛋白更少。薄层扫描测定表达的纳豆激酶占菌体总蛋白30%以上。

关 键 词:纳豆激酶  基因克隆  大肠杆菌  基因表达
文章编号:1000-2375(2003)01-0069-04

Molecular Cloning and expression of natto kinase gene in Escherichia coli
Abstract:
Keywords:natto kinase  gene cloning  Escherichia coli  expression
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