嗜水气单胞菌外膜蛋白omp TS基因的高效表达及其免疫原性 |
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引用本文: | 谢俊锋,朱静仪.嗜水气单胞菌外膜蛋白omp TS基因的高效表达及其免疫原性[J].中山大学研究生学刊(自然科学与医学版),2002,23(4):81-87. |
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作者姓名: | 谢俊锋 朱静仪 |
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摘 要: | 根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的核苷酸序列设计引物,运用聚合酶链式反应(PCR)扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒pRSET A的BamH I和EcoR I位点,构建重组质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTC诱导获得高效表达,SDS—PAGE蛋白电泳表明在39.9kD处出现超强特异带,占总蛋白的51%。以Ni-NTA-Conjugate抗体进行Western blot分析证明该39.9kD的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Western blot检测结果显示,该抗体与表达的融合蛋白和嗜水气单胞菌中提取的36.9kD外膜蛋白均呈阳性反应,表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性,从而为此融合蛋白作为疫苗的候选成份提供理论依据。
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关 键 词: | 嗜水气单胞菌 外膜蛋白 ompTS基因 基因表达 免疫原性 核苷酸序列 败血症 |
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