| Alkalibacterium sp. SL3中α-半乳糖苷酶基因的克隆、表达和性质研究 |
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| 引用本文： | 邱聪花,罗 蒙,林 娟,叶秀云,王国增.Alkalibacterium sp. SL3中α-半乳糖苷酶基因的克隆、表达和性质研究[J].福州大学学报(自然科学版),2019,47(1):136-142. |
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| 作者姓名： | 邱聪花 罗 蒙 林 娟 叶秀云 王国增 |
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| 作者单位： | 福州大学生物科学与工程学院，福建省海洋酶工程重点实验室，福建 福州 350108,福州大学生物科学与工程学院，福建省海洋酶工程重点实验室，福建 福州 350108,福州大学生物科学与工程学院，福建省海洋酶工程重点实验室，福建 福州 350108,福州大学生物科学与工程学院，福建省海洋酶工程重点实验室，福建 福州 350108,福州大学生物科学与工程学院，福建省海洋酶工程重点实验室，福建 福州 350108 |
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| 摘 要： | 以大布苏盐碱湖分离菌Alkalibacterium sp. SL3的DNA为模板，利用PCR扩增α-半乳糖苷酶基因(galSL3)，构建重组质粒pET-22b-galSL3，转化至大肠杆菌BL21（DE3）诱导表达重组酶（rGalSL3）. 通过镍柱亲和层析分离纯化重组酶，并对纯化的重组酶进行性质研究. 研究表明，纯酶rGalSL3最适pH值为5.5，最适温度为55℃；该酶在pH值 5.0~10.0保持90%以上的剩余酶活，在50℃有非常好的热稳定性. 在0~1.5mol·L-1 NaCl溶液中该酶的酶活基本不受影响，在3.0mol·L-1 NaCl溶液中有很好的稳定性. Pb2+、Ca2+、Co2+、Li+、Na+、K+、Triton-100和β-mercaptoethanol等对重组酶的活性有明显的促进作用. 该酶水解对硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷的Km、vmax和kcat分别为(2.64±0.02)μmol·mL-1、(454.55±0.59)μmol·(mg·min)-1和(347.73±1.27)s-1. 重组酶可水解蜜二糖和棉籽糖，不能水解瓜尔豆胶.
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| 关 键 词： | 嗜盐嗜碱菌 α-半乳糖苷酶 基因克隆 表达 性质分析 |
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