牛冠状病毒的增殖与提纯

以犊牛肺继代细胞增殖牛冠状病毒(BCV),用聚乙二醇(PEG6000)浓缩、超速离心和蔗糖梯度离心纯化病毒,并以小鼠红细胞测定提纯过程中每一步骤离心上清液及沉淀悬浮液中BCV的血凝(HA)滴度。发现浓缩条件不同(浓缩过程中加入NaCl和PEG6000的浓度不同),对病毒的回收率有影响,而以用2.10％NaCl的沉淀效果最好,可使上清液中残留HA滴度降至0;PEG6000的浓度对BCV沉淀效果也有影响,7.0％的PEG6000(在NaCl为2.1％时)可使离心后上清液中的HA滴度降至0。PEG6000浓度低于6.0％或离子7.5％时,沉淀效果都不佳。