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地石榴ISSR扩增体系优化及应用
引用本文:侯香莲,杨大荣,曹永强,柳青,彭艳琼.地石榴ISSR扩增体系优化及应用[J].云南大学学报(自然科学版),2011(Z1).
作者姓名:侯香莲  杨大荣  曹永强  柳青  彭艳琼
作者单位:中国科学院西双版纳植物园中国科学院热带森林生态学重点实验室;中国科学院研究生院;
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30970403,30970439)
摘    要:以地石榴为材料,通过单因素试验,对ISSR-PCR反应体系中各种影响因子,如引物浓度、dNTPs浓度、Mg2+浓度、Taq DNA聚合酶用量、模板DNA浓度、退火温度等进行了优化和筛选,建立了适合地石榴的IS-SR-PCR反应体系:20μL体系中,10×buffer 2.0μL,引物0.50μmol.L-1,dNTPs 0.15 mmol.L-1,Mg2+1.2mmol.L-1,Taq DNA酶1.25 U,模板DNA 25 ng.确定了适宜的退火温度为52℃.利用该优化后的体系从60条ISSR引物中筛选出了12条,随机选取2条对10份分布于不同地区的地石榴标本基因组DNA进行扩增,证实了该体系稳定可靠,可用于进一步分析地石榴居群遗传多样性.

关 键 词:地石榴  ISSR-PCR反应体系  优化  

Optimization and application of ISSR reaction system in Ficus tikoua
HOU Xiang-lian,YANG Da-rong,CAO Yong-qiang,LIU Qing,PENG Yan-qiong.Optimization and application of ISSR reaction system in Ficus tikoua[J].Journal of Yunnan University(Natural Sciences),2011(Z1).
Authors:HOU Xiang-lian    YANG Da-rong  CAO Yong-qiang  LIU Qing  PENG Yan-qiong
Institution:HOU Xiang-lian1,2,YANG Da-rong1,CAO Yong-qiang1,LIU Qing1,PENG Yan-qiong1(1.Key Laboratory of Tropical Forest Ecology,Xishuangbanna Tropical Botanical Garden,Chinese Academy of Sciences,Kunming 650223,China,2.Graduate School of the Chinese Academy Sciences,Beijing 100039,China)
Abstract:
Keywords:Ficus tikoua  ISSR-PCR reaction system  optimization  
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