葡萄愈伤组织RNA提取方法比较及部分基因的表达差异初步分析 |
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引用本文: | 代茹,冀敏,舒小梅,陈尚武,张文,马会勤.葡萄愈伤组织RNA提取方法比较及部分基因的表达差异初步分析[J].云南大学学报(自然科学版),2009,31(4):410-415. |
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作者姓名: | 代茹 冀敏 舒小梅 陈尚武 张文 马会勤 |
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作者单位: | 1. 中国农业大学农学与生物技术学院, 北京 100193; 2. 中国农业大学食品科学与营养工程学院, 北京 100083 |
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摘 要: | 以欧亚种酿酒葡萄品种赤霞珠(Vitis viniferaL.cv.Cabernet Sauvignon)的胚性愈伤组织(EC)和非胚性愈伤组织(NEC)为材料,进行了总RNA不同提取方法的比较.结果表明葡萄EC和NEC的总RNA的最佳提取方法是RNAplant试剂法.通过此方法提取的总RNA完整性好,28S和18S条带清晰,且OD260/280nm值都在1.8~2.0之间.以此RNA为模板,对actin,tubulin,CLV等基因进行了半定量RT-PCR对比,发现EC与NEC在不同基因表达上存在差异.以上结果说明,以RNAplant试剂提取的RNA质量,可以满足cDNA合成和qRT-PCR等研究用途.这为深入研究葡萄花药愈伤组织胚性与非胚性细胞系的基因表达特点,以及葡萄体细胞胚发育过程中的基因时序表达奠定了基础.
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关 键 词: | Vitis vinifera L. 愈伤组织 总RNA提取 RT-PCR |
收稿时间: | 2009-3-23 |
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