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| 扩展青霉碱性脂肪酶的纯化及N-端氨基酸序列分析 | |
| 引用本文： | 林琳,施巧琴,郭小玲,吴松刚,吴祥甫,谢联辉.扩展青霉碱性脂肪酶的纯化及N-端氨基酸序列分析[J].厦门大学学报(自然科学版),2002,41(5):600-604. |
| 作者姓名： | 林琳 施巧琴 郭小玲 吴松刚 吴祥甫 谢联辉 |
| 作者单位： | 1. 福建师范大学生物工程学院,福建,福州,350007;中国科学院上海生物化学研究所,上海,200031;福建农林大学病毒研究所,福建,福州,350002 2. 福建师范大学生物工程学院,福建,福州,350007 3. 厦门大学海洋与环境学院,福建,厦门,361005 4. 中国科学院上海生物化学研究所,上海,200031 5. 福建农林大学病毒研究所,福建,福州,350002 |
| 基金项目： | 国家“九五”重大科技攻关项目 (96c 0 3 0 2 0 1)，福建省自然科学基金重点项目 (B0 12 0 0 0 1)资助 |
| 摘 要： | 扩展青霉PF898的发酵液经硫酸铵沉淀、DE52纤维素离子交换柱、Sephadex G100凝胶过滤等步骤，其碱性脂肪酶的活性被纯化了79．3倍，回收率约15％，此活为76．9U／mg。纯化蛋白经SDS－PAGE和HPLC TSK－GEL G3000SW凝胶过滤分析显示其分子量约为28kDa。纯化蛋白经氨基酸序列测定仪分析表明，其N－端12个氨基酸的序列为：A－T－A－D－A－A－A－F－P－D－L－H。 |
| 关 键 词： | N－端氨基酸 序列分析 扩展青霉 碱性脂肪酶 蛋白质纯化 水解酶 酶活性 |
| 文章编号： | 0438-0479(2002)05-0600-05 |
| 修稿时间： | 2002年5月20日 |
Purification and N-terminal Sequencing of an Alkaline Lipase from Penicillium expansum |
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| LIN Lin ,,SHI Qiao-qin ,GUO Xiao-ling ,WU Song-gang ,WU Xiang-fu ,XIE Lian-hui.Purification and N-terminal Sequencing of an Alkaline Lipase from Penicillium expansum[J].Journal of Xiamen University(Natural Science),2002,41(5):600-604. | |
| Authors: | LIN Lin SHI Qiao-qin GUO Xiao-ling WU Song-gang WU Xiang-fu XIE Lian-hui |
| Institution: | LIN Lin 1,2,3,SHI Qiao-qin 1,GUO Xiao-ling 4,WU Song-gang 1,WU Xiang-fu 2,XIE Lian-hui 3 |
| Abstract: | The alkaline lipase produced by Penicillium expansum PF898 at a high level was purified 79.3-fold by ammonium-sulfated precipitation, DE52 ion exchange chromato-graph and Sephadex G 100 gel filtration to a final specific activity of 76.9U/mg. The molecular weight of the enzyme was about 28 kDa determined by SDS-PAGE and gel filtration. Purified protein was electrophoretically transfered to a PVDF membrane to analysis N-terminal amino acid sequence. The 12 aa of N-terminal are A-T-A-D-A-A-A-F-P-D-L-H and 3 of them are different from the N-terminal sequence of P. expansum DSM1994:V-A-A-S-A-A-F-P-D-L-X. The homologous is about 75% between the two N-terminal sequences. |
| Keywords: | Penicillium expansum alkaline lipase purification |
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