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含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的家蚕同源重组质粒载体的构建
引用本文:桂慕燕,叶向群,吴春旭,熊秀芳.含增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的家蚕同源重组质粒载体的构建[J].厦门大学学报(自然科学版),2002,41(5):628-633.
作者姓名:桂慕燕  叶向群  吴春旭  熊秀芳
作者单位:厦门大学生命科学学院,细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室,福建,厦门,361005
基金项目:国家自然科学基金 (39870 410 ),厦门大学校级自选课题 (Y0 70 14)资助项目
摘    要:以含家蚕丝心蛋白重链基因同源片段的质粒pG350为出发质粒,插入增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,构建成以EGFP为报告基因的同源重组质粒载体pMD-Fib-IE-EGFP,通过PCR及酶切鉴定表明EGFP以正确的方式插入到原始质粒中,通过脂质体介导法转染胃癌细胞能发出很强的绿色荧光,表明该质粒能够在真核细胞中表达,为进一步建立完善的家蚕转基因系统平台提供基因材料。

关 键 词:EGFP  家蚕  同源重组质粒载体  增强型绿色荧光蛋白基因  转基因蚕  载体构建  基因表达
文章编号:0438-0479(2002)05-0628-06
修稿时间:2002年5月20日

Construction of a Homologous Recombination Plasmid Vector pMD-Fib-IE-EGFP Carrying EGFP as Reportor Gene
GUI Mu-yan,YE Xiang-qun,WU Chun-xu,XIONG Xiu-fang.Construction of a Homologous Recombination Plasmid Vector pMD-Fib-IE-EGFP Carrying EGFP as Reportor Gene[J].Journal of Xiamen University(Natural Science),2002,41(5):628-633.
Authors:GUI Mu-yan  YE Xiang-qun  WU Chun-xu  XIONG Xiu-fang
Abstract:A new plasmid vector pMD-Fib-IE-EGFP which contains enhanced green fluorescent protein gene as reportor gene was constructed by subtitute EGFP for GFP in the original plasmid pG350. The recombinant plasmid was identified by restriction endonuclease enzyme analysis and PCR. The recombined plasmid was transferred to stomach cancer cell mediated by lipofectine. The transfected cell expressed strong fluorescence. The constructed plasmid vector provided foreign DNA material for transgenic silkworm.
Keywords:enhanced green fluorescent protein  transgenic silkworm  plasmid vector
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