| 噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库的构建 |
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| 引用本文： | 田栢会,易乐,王习文,李颂,付世杰,王雨田,曲晗,李志萍,王丽萍,张淑华,夏志平.噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库的构建[J].吉林大学学报(理学版),2019,57(4):989-996. |
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| 作者姓名： | 田栢会 易乐 王习文 李颂 付世杰 王雨田 曲晗 李志萍 王丽萍 张淑华 夏志平 |
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| 作者单位： | 长春理工大学生命科学技术学院,长春130022;中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春130122;中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所,长春,130122;吉林大学生命科学学院,长春,130012;长春理工大学生命科学技术学院,长春,130022 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划;吉林省教育厅科技发展计划 |
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| 摘 要： | 构建T7噬菌体展示禽流感病毒抗原变异性基因片段文库. 首先， 从Gene Bank中查找筛选禽流感病毒抗原变异性基因, 将其截短、 修饰、 简并后得到禽流感病毒抗原变异性基因微阵列. 其次， 将合成的禽流感病毒抗原变异性基因片段文库扩增、 酶切, 链接到双酶切后的T7噬菌体载体基因上, 构成重组噬菌体DNA. 最后， 重组噬菌体DNA经体外包装和扩增, 得到T7噬菌体展示文库, 并进行T7噬菌体展示文库滴度、 重组率和免疫活性测定. 实验结果表明, 从Gene Bank中查找、 筛选、 剪切和修饰共获得96 258条序列构建T7噬菌体展示文库, 原始文库滴度为3.6×107个菌落/mL, 重组率大于90%. 用禽流感病毒H5N1抗体进行捕获, 经聚合酶链式反应(PCR)鉴定, 得到理想目的条带, 证明噬菌体表面展示蛋白具有抗原活性, 可用于禽流感病毒感染患者的快速检测及抗原表位筛选.
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| 关 键 词： | T7噬菌体 噬菌体展示 禽流感病毒 抗原变异性基因 文库鉴定 |
| 收稿时间： | 2018-12-13 |
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