运动发酵单胞菌定点整合质粒的构建 |
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引用本文: | 邹少兰,洪解放,马媛媛,张一婷,张鲲,张敏华.运动发酵单胞菌定点整合质粒的构建[J].南开大学学报,2009,42(6). |
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作者姓名: | 邹少兰 洪解放 马媛媛 张一婷 张鲲 张敏华 |
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作者单位: | 邹少兰,洪解放,马媛媛,张鲲(天津大学石油化工技术开发中心,天津,300072);张一婷(中国环境管理干部学院实验中心,河北秦皇岛,066004);张敏华(天津大学石油化工技术开发中心,天津300072;天津大学内燃机燃烧学国家重点实验室,天津300072) |
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摘 要: | 运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)是目前发现的乙醇发酵能力最强的微生物之一,被认为是进行大规模乙醇生产的潜在菌种,但其可利用的碳源范围窄.对其进行分子生物学基础研究和基因工程改造的工作早在上世纪八、九十年代就开始了,但基于其独特的生物学特性,至今遗传操作手段仍不成熟.以大肠杆菌(E.coli)pBR328为出发质粒,分段插入带Z.mobilis乳酸脱氢酶基因ldh、分别作为左右同源臂、1.5 kb大小的DNA片段,构建了Z.mo-bilis定点整合型质粒pBR328-ldhR-ldhL(6 239 bp),此质粒两同源臂片段即ldhR和ldhL的中间有稀有酶切位点NotI和SfiI,以方便插入待整合片段.经Notl位点插入1 216 bp氯霉素抗性基因cml,将相应质粒pBR328-ldhR-cml-ldhL以环型和线型形式分别电击转化Z.mobilis ZM4菌株,都成功筛选到了ZM4 ldh::cml菌株,证明此定点整合质粒是方便可用的,为对Z.mobilis的定点遗传操作提供了很好的基础.
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关 键 词: | 运动发酵单胞菌 定点整合质粒 ldh基因 cml基因 定点整合 |
Construction of a Specific Integrating Plasmid for Zymomonas mobilis |
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Abstract: | |
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Keywords: | Zymomonas mobilis specific integrating plasmid ldh gene cml gene specific integration |
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