| 两种帕金森体外模型的构建及相关研究 |
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| 引用本文： | 王可心,李煦照,徐红英,张宁,刘树民.两种帕金森体外模型的构建及相关研究[J].哈尔滨商业大学学报(自然科学版),2015(1). |
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| 作者姓名： | 王可心 李煦照 徐红英 张宁 刘树民 |
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| 作者单位： | 1. 黑龙江中医药大学中医药研究院中药毒理学实验室,哈尔滨,150040
2. 黑龙江中医药大学中医药研究院细胞生物学研究室,哈尔滨,150040
3. 黑龙江中医药大学药物安全性评价中心,哈尔滨,150040 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目(81073019)；高等学校博士学科点专项科研基金 |
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| 摘 要： | 为检测a-突触核蛋白(a-Synuclein)在人神经元母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中的表达,构建人野生型(WT)和A53T突变型a-Synuclein质粒(p EGFP-SNCA-WT和p EGFP-SNCA-A53T),经酶切鉴定无误后转染SH-SY5Y细胞,并对转染完成的细胞进行嘌呤霉素筛选,然后通过PCR法扩增转染后SH-SY5Y细胞的a-Synuclein片段,并对其进行测序,检测目的基因,运用Western blot法检测转染后SH-SY5Y细胞中a-Synuclein的表达.酶切鉴定结果表明p EGFP-SNCA-WT和p EGFP-SNCA-A53T质粒构建成功,嘌呤霉素筛选和转基因细胞a-Synuclein片段测序结果显示慢病毒表达载体能成功的整合到SH-SY5Y细胞基因组中,Western blot结果表明,转染后的SH-SY5Y细胞能成功的过表达a-Synuclein.a-Synuclein慢病毒表达载体构建成功,并且SH-SY5Y细胞作为宿主细胞能够表达a-Synuclein.为今后帕金森病(PD)体外模型的建立及帕金森病发病机制的研究奠定了基础.
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| 关 键 词： | a-突触核蛋白 慢病毒表达载体 人神经元母细胞瘤细胞 帕金森病 |
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