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重组人粒细胞集落刺激因子在Escherichia coli中的表达研究
引用本文:乌垠,杨红,陆军,胡波,麻彤晖,李玉新,郝水.重组人粒细胞集落刺激因子在Escherichia coli中的表达研究[J].东北师大学报(自然科学版),2000,32(4):46-51.
作者姓名:乌垠  杨红  陆军  胡波  麻彤晖  李玉新  郝水
作者单位:东北师范大学遗传与细胞研究所,吉林,长春,130024
基金项目:吉林省科委科技发展计划基金资助项目!( 9530 1 4 )
摘    要:根据人天然粒细胞集落刺激因子(G-CSF)基因序列设计出引物,通过RT-PCR从人外周血单个核细胞mRNA获得G-CSFcDNA片段,将该片段与原核表达载体pT7构建成重组体,导入大肠杆菌后发现天然G-CSFcDNA表达量并不理想,这可能是由于天然hG-CSF5’端G+C的比例过高,使转录后的mRA很容易形成二级结构而影响翻译起始,因此在大肠杆菌中很难获得高效表达,根据密码子简并性原则,在不改变编码氨基酸顺序的前提下,通过重新设计PCR引物,将hG-CSF的前3个氨基酸密码子中的几个GC碱基作了改动,获得了新的cDNA突变体,将其与PT7的重组导入大肠杆菌,获得了高效表达。

关 键 词:粒细胞集落刺激因子  原核表达  G-CSFcDNA片段
文章编号:1000-1832(2000)04-0046-06
修稿时间:2000-07-03

Recombinant human granulocyte colony-stimulating factor expressed in Escherichia coli
WU Yin,YANG Hong,LU Jun,HU Bo,MA Tong-hui,LI Yu-xin,HAO Shui.Recombinant human granulocyte colony-stimulating factor expressed in Escherichia coli[J].Journal of Northeast Normal University (Natural Science Edition),2000,32(4):46-51.
Authors:WU Yin  YANG Hong  LU Jun  HU Bo  MA Tong-hui  LI Yu-xin  HAO Shui
Institution:WU Yin ,YANG Hong ,LU Jun ,HU Bo ,MA Tong-hui ,LI Yu-xin (Institute of Genetics and Cytology, Northeast Normal University, Changchun 130024, China)
Abstract:
Keywords:G-CSF  prokaryotic expression  mutant
本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录!
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