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扩展青霉碱性脂肪酶的克隆、表达及表达产物的活性分析
引用本文:陈丹,卢士英,柳增善.扩展青霉碱性脂肪酶的克隆、表达及表达产物的活性分析[J].河北师范大学学报(自然科学版),2008,32(2):234-238.
作者姓名:陈丹  卢士英  柳增善
作者单位:吉林大学,畜牧兽医学院,吉林,长春,130062
摘    要:以扩展青霉为出发菌株,用Biospin RNA Simply P试剂盒提取其总RNA,反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增出扩展青霉碱性脂肪酶结构基因.构建真核重组表达质粒pEL-pIC9,电转化His4缺陷型巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,利用MD-MM平板及PCR方法筛选和鉴定出重组子,进行甲醇诱导表达.重组子发酵液经SDS-PAGE分析显示获得了分子量约28ku的1条特异条带,用橄榄油检验板法和NaOH滴定法测其活性,酶活可达225U/mL.结果表明,扩展青霉碱性脂肪酶基因在巴斯德毕赤酵母中能高效表达为有脂肪酶活性的高活力酶.

关 键 词:扩展青霉  碱性脂肪酶  毕赤酵母  基因表达
文章编号:1000-5854(2008)02-0234-05
修稿时间:2007年7月27日

Cloning and Expression of Structural Gene Encoding Alkaline Lipase from Penicillium expansum
CHEN Dan,LU Shi-ying,LIU Zeng-shan.Cloning and Expression of Structural Gene Encoding Alkaline Lipase from Penicillium expansum[J].Journal of Hebei Normal University,2008,32(2):234-238.
Authors:CHEN Dan  LU Shi-ying  LIU Zeng-shan
Abstract:
Keywords:
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